| 實驗方法原理 | IPG IEF 膠用 Immobilines制備。 lmmobilines 是擁有 結構的8 種丙烯酰胺衍生物系列，其中 R 包含羧基或叔氨基團，它們構成了分布在 pH3-10 不同值的緩沖體系。根據公布的配方估算后，將適宜的 IPG 試劑添加至混合物中用于凝膠聚合，在聚合中，緩沖基團通過乙烯鍵共價聚合至聚丙烯酰胺骨架中，形成 pH 梯度。通過這種方式生成的 IPG, 不會發生電滲透作用，因而可以進行特別穩定的 IEF 分離，達到真正的平衡狀態。 |
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| 實驗材料 | |
| 實驗步驟 | 將所需 pH 范圍的 IPG 平板膠在 GelBond PAGfilm (圖3. lb) 上聚合，之后，凝膠用去離子水全面沖洗 (6X 10min), 浸人在 2% (m/V) 甘油中 (30min), 常溫下在潔凈櫥中干燥，然后用塑料膜覆蓋，如果凝膠不立即使用，可在-20℃ 貯存一年。用前，用切紙機從 IPG 平板膠切下所需數目的干膠條（圖 3.lc) 。此外，各種 pH范圍商品化的預制 IPG 膠條可購得。可用不同長度的 IPG 膠條，但要切記的是，通常分離區域越大，能分辨的蛋白質越多。 18 或 24cm 膠條通常用于高分辨分離，而短膠條 (4cm, 7rm 或 11cm) 則應用于快速篩選。有大量不同寬或窄 pH 梯度范圍條件可供選用于 IPG IEF。
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