將抗原與佐劑混合的過程稱為乳化。乳化的方法很多，可采用研缽乳化；可直接在旋渦振蕩器上乳化；可用組織搗碎器乳化。少量時，特別是弗氏佐劑與抗原乳化時，常采用注射器乳化，用兩個注射器，一個吸入抗原液，一個吸入佐劑，兩注射器頭以膠管連接，注意一定扎緊，然后來回抽吸。當大量乳化時，可采用膠體磨進行。
乳化好的標志是取一滴乳化劑滴入水中呈現球形而不分散。如出現平展擴散即為未乳化好。乳化過的物質放置一段時間（在保存期內）出現油水分層也是未乳化好的表現。 根據抗原的性質、免疫原性和動物的免疫反應性來決定免疫途徑、免疫次數和間隔時間等。 免疫途徑包括皮下注射、皮內注射、肌肉注射、靜脈注射、腹腔注射以及淋巴結內注射等。抗原量少，則一般多采用加佐劑，淋巴結內或淋巴結周圍、或足掌、或皮內、皮下多點注射，如抗原量多，則可采用皮下、肌肉、以至靜脈注射。 注射間隔時間 帶佐劑的皮內、皮下注射，一般為間隔 2～4 周免疫一次。不帶佐劑的皮下或肌肉注射，一般為 1～2 周間隔時間；肌肉或靜脈免疫的，可 5 天左右的間隔時間。 可以把各種注射途徑聯合起來應用，最終以達到效價要求為目的。