間接免疫熒光試驗介紹:
間接免疫熒光試驗是用對應某一種抗原的抗體(這里被稱為一抗)與細胞孵育結合,在采用對應一抗(也就是抗一抗)的抗體(這里被稱為二抗,二抗上偶聯有熒光素分子)與細胞孵育結合后在熒光顯微鏡下觀察。
間接免疫熒光試驗正常值:
<1:64
間接免疫熒光試驗臨床意義:
異常結果:
單份血清效價≥1:64或雙份血清效價呈4倍增長或有IgM抗體出現即可診斷為立克次體感染。本法不能區分患者感染的立克次體的類型。特異性抗立克次體的IgM抗體的出現提示新近感染。
需要檢測的人群:
先天性弓形體感染 地方性斑疹傷寒 寇熱 小兒支原體肺炎 布氏菌病等
間接免疫熒光試驗注意事項:
檢查前:
抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食 物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。體檢前一天 的晚八時以后,應禁食,以免影響第二天空腹血糖等指標的檢測。
檢查時:
應放松心情,避免因恐懼造成血管的收縮、增加采血的困難
不適宜人群:沒有
間接免疫熒光試驗檢查過程:
(1) 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,10min后棄去,使標本保持一定濕度。
(2) 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間(參考:30min)。
(3) 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時振蕩。
(4)取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
(5)立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,一般可用“+”表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標本特異性熒光染色強度達“++”以上,而各種對照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
相關疾病
康諾爾立克次體斑疹熱,沙眼衣原體肺炎,鸚鵡熱衣原體肺炎,肺炎衣原體肺炎,貓抓病,立氏立克次體斑疹熱,寇熱,風疹,兔熱病,西伯利亞立克次體斑疹熱
相關癥狀
咽痛聲啞,暴曬后的皮膚損害,細胞感染增大,局部游走性紅斑,先天性弓形體,渾身忽冷忽熱,腹脹,脾腫大,肝腫大,腹痛