1、生物學技術—RT-PCR技術— 從RNA（或mRNA）反轉錄合成cDNA第一鏈：
2、生物學技術—RT-PCR技術— 于95℃加熱5～10min，滅活反轉錄酶，使RNA—cDNA雜交體變性，然后迅速冰浴冷卻：
3、生物學技術—RT-PCR技術— PCR擴增：方法基本同PCR。
cDNA第一鏈合成方法：20ul反應液中含10xPCR擴增緩沖液，2ul；四種dNTP（10 mmol/L）2ul；RNA酶抑制劑20U；mRNA，l～2ug（或RNA 5-10ug）；AMV，20U；引物，1u；最后用滅菌水補至20ul。 以上溶液充分混勻后，于42℃反應60min，反應完畢后將反應管在95℃下加熱5min，使反轉錄酶失活和RNA—cDNA雜合物變性。其后反應液則可置于-20℃下保存備用。