1、血常規
白細胞總數及中性粒細胞百分比大多正常。
2、腦脊液檢查
癱瘓前期及癱瘓早期可見細胞數增多（以淋巴細胞為主），蛋白增加不明顯，呈細胞蛋白分離現象，對診斷有一定的參考價值。至癱瘓第3周，細胞數多已恢復正常，而蛋白質仍繼續增高，4～6周后方可恢復正常。
3、病毒分離
病毒分離是本病最重要的確診性試驗。起病一周內可從咽部及糞便內分離出病毒，可用咽拭子及肛門拭子采集標本：間隔24～48h收集雙份標本（重量>5g），及時冷藏4℃以下送檢，多次協和送檢可增加陽性率。發病1周內，從患兒鼻咽部、血、腦脊液中也可分離出病毒。
4、血清學檢查
近期未服用過脊髓灰質炎疫苗的患者，發病1個月內用酶聯免疫吸附實驗法（ELISA法）檢測患者血液及腦脊液中抗脊髓灰質炎病毒特異性免疫球蛋白M（IgM）抗體，可幫助早期診斷；恢復期患者血清中特異性免疫球蛋白G（IgG）抗體滴度較急性期有4倍以上增高，有診斷意義。