對第一例病人及時發現與確診，對本病的控制與預防極為重要。
（一）流行病學資料 當地曾有鼠間鼠疫流行或有赴疫區史；有接觸可疑動物或類似患者。
（二）臨床資料 根據各型臨床特點。
（三）實驗室診斷是確定本病最重要依據。對一切可疑病人均需作細菌學檢查，對疑似鼠疫尸體，應爭取病解或穿刺取材進行細菌學檢查。血清學應以雙份血清升高4倍以上作為診斷依據。
1．常規檢查
（1）血象 白細胞總數大多升高，常達20～30×109/L以上。初為淋巴細胞增高，以后中性粒細胞顯著增高，紅細胞、血紅蛋白與血小板減少。
（2）尿 尿量減少，有蛋白尿及血尿。
（3）大便 腸炎型者呈血性或粘液血便，培養常陽性。
2．細菌學檢查 采淋巴結穿刺液、膿、痰、血、腦脊液進行檢查。
（1）涂片檢查 用上述材料作涂片或印片，革蘭氏染色，可找到G－兩端濃染的短桿菌。約50～80%陽性。
（2）細菌培養 檢材接種于普通瓊脂或肉湯培養基。血培養在腺鼠疫早期陽性率為70%，晚期可達90%左右。敗血癥時可達100%陽性。
（3）動物接種 將標本制成生理鹽水乳劑，注射于豚鼠或小白鼠皮下或腹腔內，動物于24～72小時死亡，取其內臟作細菌檢查。
（4）噬菌體裂解試驗 用鼠疫噬菌體加入已檢出的可疑細菌中，可看到裂體及溶菌現象。
3．血清學檢查
（1）間接血凝 用F1抗原檢測患者或動物血清中F1抗體。F1抗體持續1～4年，故常用于流行病學調查及回顧性診斷。
（2）熒光抗體染色檢查 用熒光標記的特異性抗血清檢測可疑標本。特異性、靈敏性較高。
（3）其它 酶聯免疫吸附試驗，放射免疫沉淀試驗可測定F1抗體，靈敏性高，適合天大規模流行病學調查。