減小色譜柱的尺寸規格
通常在HPLC分析中,經常使用直徑4.6mm的柱子。而在保持分離度不變的條件下,通過減小色譜柱的尺寸可減少流動相的消耗量。從圖4中可以看出,流動相的消耗量將隨著色譜柱內徑的減小而相應減少,具體如下所示:
4.6 mm I.D.→3.0 mm I.D.→2.0 mm I.D.
100%→43%→19%。
盡管2mm內徑的色譜柱只適合用于半微量高效液相色譜系統, 但是3mm內徑的色譜柱可用于常規的液相色譜系統,因此使用3mm內徑的色譜柱可以作為減少流動相用量的方法之一。
而且減小色譜柱的內徑還可以增加峰高度和提高靈敏度。當使用3mm色譜柱時,進樣量僅為4.6mm柱的40%就可以達到與4.6mm柱相同的峰高度。

圖4. 不同內徑色譜柱對溶劑用量的影響。
色譜條件如下:
色譜柱:TSKgel ODS-100V 3μm;(4.6 mm I.D.×15cm);(3.0 mm I.D.×15cm );(2.0 mm I.D.×15cm)。
流量:1.0 ml/min(4.6 mm I.D.); 0.43 ml/min(3.0 mm I.D);0.19 ml/min(2.0 mm I.D.)。
檢測器:UV;檢測波長:254 nm;柱溫:40℃。
進 樣:5μl(4.6 mm I.D.);2μl(3.0 mm I.D.);1μl(2.0 mm I.D.)。
樣品:1. 苯酚(40 mg/L);2. 鄰苯基苯酚(5 mg/L);3. 萘(20 mg/L);4. 聯苯(5 mg/L)。
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