利用Marligen總RNA快速純化系統純化總RNA實驗

乙醇β-巰基乙醇

轉子-定子均化器或類似設備Marligen Rapid Total RNA System

一、材料

1.緩沖液、溶液和試劑

乙醇,70%和100%

β-巰基乙醇

2.特殊設備

轉子-定子均化器或類似設備

3.其他

Marligen Rapid Total RNA System(Marligen Biosciences)

二、方法

(1）加β-巰基乙醇制備裂解溶液。

(2）按照廠商的方案要求，向細胞和組織樣品中加裂解溶液（裂解液體積取決于所處理樣品的大小）。用轉子-定子均化器或類似設備均化。

(3）向裂解產物中加等體積的70%乙醇。均質化裂解產物以使沉淀分散。

(4）將裂解產物置隨試劑盒提供的離心套柱中，在微量離心機中12000~16000g離心。

(5）用700ul洗滌緩沖液1洗滌一次，12000~16000g離心1min。

(6）用洗滌緩沖液2洗滌兩次，每次500ul,12000~16000g離心1min。

(7）12000~16000g離心2min以移棄殘留洗滌緩沖液。

(8）參照試劑盒的使用說明用適董的水從柱中洗脫RNA。然后儲存于-70°C。較少的樣品可用45ul水洗脫，樣品較多可用20ul水洗脫。