DTT在水溶液的半衰期恰好是3－5天，β-ME的更短，只有幾十個小時。
普通的SDS-PAGE是還原變性膠，如果loading buffer在4度放置時間較長（>1 week)，用來上樣的話，就等于做非還原變性膠。
對于普通的蛋白來講，分子內二硫鍵很少或者干脆沒有，用陳舊的loading buffer和新的loading buffer（臨用前補加還原劑）沒有什么區別。
如果你的蛋白巰基較多，而且暴露在分子表面，容易氧化形成分子間二硫鍵，上述兩種膠就有很大區別，有可能看見比正常條帶大一到幾倍的雜帶，