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  • 發布時間:2019-04-05 21:24 原文鏈接: 動物細胞培養——無菌技術I:吸取與移液

    實驗方法原理目的

    快速準確地將液體從一個容器轉移到另一個容器。

    訓練目標

    熟練掌握吸管的使用,掌握必要的速度、準確性和精度。

    監督:開始時連續監督,然后讓實習生重復練習并記錄準確度。

    時間:30 min~ l h。

    背景信息

    已滅菌液體的操作(見 5.2.7 節);試劑瓶和培養瓶的操作(見 6.3.4 節);移液(見 6.3.5 節)。

    示范材料或操作:教師需示范操作吸管,將吸管插人移液器,轉移液體,并對速度和準確性間的平衡給出指導建議。教師也需要示范用真空泵抽出液體(如果實驗室采用)并解釋其機制和安全性規定。

    標準方案

    在垂直式層流潔凈臺中的無菌技術(見方案6.”或在敞開的工作臺上進行操作(見方案6.2)。在著手整個方案前,讓實習生練習簡單的操作,如將水從試劑瓶中移到廢液燒杯中。這可以使得練習者在進行無菌操作前便能熟悉操作。
    實驗步驟

    實驗變化

    l)這個練習的目的在于提高雙手的靈巧性及無菌環境下對吸管和試劑瓶的操作。下面的附加步驟用于提高趣味性和檢查實習生的完成情況。

    2)先稱量一’一下培養瓶并作為接受容器。

    a)向5個培養瓶中各加入sm!液體。
    b)使用sml吸管。

    3)使用25ml吸管。

    4)記錄完成移液的時間。

    5)再一次稱量培養瓶。

    6)孵育培養瓶看有沒有污染。

    數據

    l)計算每個培養瓶中液體的平均重量。

    2)記錄其范圍并且

    a)計算分裝液體體積所占的百分比,或

    b)計算平均值或標準差:

    i)將數值填入Excel表格。

    ii)將光標移動到數據列下面的一格。

    iii)按下標準工具條中“藝”按鈕,選擇平均值。

    iv)如果沒有自動選擇,則選擇一列數值,按“Enter”鍵。這會給出數據的平均值。

    v)將光標放置到下一格。

    vi)按下標準一工具條中“藝”按鈕,選擇其他功能,然后選擇STDEV。

    vii)如果沒有自動選擇,則選擇一列數據,并按“Enter”鍵。就得出了數據的相應標準差,據此你可以將它換算成平均值的百分比,由此可知移液操作的準確性。

    展開 
    注意事項

    分析

    l)比較每一個吸管的結果并評論其差別。

    a)準確性。

    b)時間。

    2)如何正確選擇吸管?

    3)在移液的精度范圍內可接受的誤差是多少?

    4)絕對的準確性或一致性哪個更重要?

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