在反相色譜法中共價結合到載體上的固定相是一些極性很弱的直鏈碳氫化合物,如正辛基等。在反相色譜中的流動相極性要很強,而水是極性最強的溶劑。所以常常用水和不同濃度的、可以與水混溶的有機溶劑混合,以得到不同強度的流動相,這些有機溶劑稱為修飾劑。反相色譜中最常用的有機溶劑有甲醇和乙腈,此外,乙醇、四氫呋喃、異丙醇及二氧六環也常被用作修飾劑。所謂反向,是指出峰次序先出極性強的組份,后出極性弱的組份。