試劑、試劑盒 本方法包括方案 8 中所有物品加上: 甲酰胺(100%)
實驗步驟
材料
本方法包括方案 8 中所有物品,加上:
甲酰胺(100%)
方法
1. 依方案 8 步驟 1~8 淸洗并安裝玻璃板制成膠模。
2. 在實驗桌的工作區上鋪上襯塑料的保護紙。
灌制測序凝膠時幾乎不可避免將丙烯酰胺溶液滴于桌面,可準備一個大托盤對其進行收集。
3. 在一個 250 ml 有臂錐形瓶中配制適當濃度的丙烯酰胺溶液(表 12-20)。這些溶液足夠配制一塊 40 cmx40 cm 的測序凝膠。
重要:凝膠的配制必須一氣呵成,中堿間不能斷斷續續。
4. 混合所有試劑,在 55°C 水浴中加熱 3 min 幫助尿素溶解。
溶解尿素的過程十分緩慢,必須依靠外部加熱。
5. 從水浴中取出溶液,冷卻 15 min 至室溫。不斷攪拌混合物。加水到 100 ml。
6. 把燒瓶放在真空裝置里抽去氣體。
防止聚合時產生氣泡,該過程會產生熱量。
7. 把溶液放入 150 ml 玻璃燒杯中。加 3.3 ml 新制的 1.6% 的過硫酸銨,輕輕攪動溶液使試劑混勻。