嗎啡照高效液相色譜法(通則0512)測定。固相萃取柱的前處理、系統適用性試驗與要求取固相萃取柱1支(用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑),依次用甲醇水(3:1)15m1與水5ml沖洗,再用pH值約為9的氨水溶液(取水適量,滴加氨試液至pH值為9)沖洗至流出液pH值約為9,待用。精密量取每1ml中約含嗎啡對照品50μg的5%醋酸溶液1ml,置處理后的固相萃取柱上,以供試品溶液中相同的洗脫條件洗脫,用5ml量瓶收集洗脫液至刻度,搖勻,作為固相苯取柱系統適用性溶液。精密量取該溶液與對照品溶液各10l,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。固相萃取柱系統適用性試驗結果(fs)按下列公式計算,應在0.97~1.03之間Ax/C系統適用性試驗結果(fs)式中Ax為系統適用性溶液中嗎啡峰面積;AR為對照品溶液中嗎啡峰面積;Cx為系統適用性溶液濃度;CR為對照品溶液濃度供試品溶液取本品30片,精密稱定,研細,精密稱取約10片量,置磨口錐形瓶中,精密加水90ml,超聲5分鐘,精密加稀鹽酸(6→-10)10ml,搖勻,超聲20分鐘使嗎啡溶解,取出,放冷,濾過;精密量取續濾液1ml,置處理后的固相萃取柱上滴加氨試液適量使柱內溶液的pH值約為9(上樣前,另取同體積的續濾液預先調試,以確定滴加氨試液的量),搖勻,待溶劑滴盡后,用水約20ml沖洗,以含2%甲醇的5%醋酸溶液洗脫,用5ml量瓶收集洗脫液至刻度,搖勻。對照品溶液取嗎啡對照品適量,精密稱定,加含2%甲醇的5%醋酸溶液溶解并定量稀釋制成每1m中約含10μg的溶液。色譜條件用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以50mmol/L磷酸二氫鉀溶液-2.5mmol/L庚烷磺酸鈉溶液-乙腈(5:5:2)為流動相;檢測波長為220nm;進樣體積20l。系統適用性要求理論板數按嗎啡峰計算不低于1000。測定法精密量取供試品溶液和對照品溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算。甘草酸照高效液相色譜法(通則0512)測定。溶劑甲醇-水(1:1)。供試品溶液取本品20片,精密稱定,研細,精密稱取約1片量,置50ml量瓶中,加溶劑適量,超聲30分鐘使甘草酸溶解,取出,放冷,用溶劑稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續濾液對照品溶液取甘草酸銨對照品適量,精密稱定,加溶劑溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.15mg的溶液。色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以25mmol/L磷酸二氫鉀溶液-2.5mmol/L庚烷磺酸鈉水溶液-乙腈(33:33:44)為流動相;檢測波長為250nm;進樣體積10dl。系統適用性要求理論板數按甘草酸峰計算不低于2000,甘草酸峰與相鄰色譜峰之間的分離度應符合要求測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注人液相色譜儀,記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算,并將結果乘以0.9797。