對流免疫電泳是在瓊脂擴散基礎上結合電泳技術而建立的一種簡便而快速的方法。此方法能在短時間內出現結果，故可用于快速診斷，敏感性比雙向擴散技術高10~15倍。
【實驗目的】
通過本實驗的學習，復習鞏固免疫學的基本知識，了解對流免疫電泳的基本原理及其用途，并掌握對流免疫電泳的操作步驟及技能。
【實驗原理】
抗原抗體在一定的pH溶液中帶有電荷，在電場的作用下可發生定向移動。將抗原抗體加入pH8.6的瓊脂凝膠中，抗體只帶有微弱的負電荷，而且它的分子量又較大，所以泳動慢。更重要的是抗體分子受電滲作用影響較大，也就是說電滲作用大于它本身的遷移率。在電泳時，抗體不但不能抵抗電滲作用向正極移動，反而向負極倒退。而一般抗原蛋白帶負電荷，將抗原置于負極，將抗體置于正極，電泳后則在兩孔之間相遇，并在比例適當的部位形成肉眼可見的沉淀線。
【試劑與器材】
1. 抗原及相應免疫血清。
2. pH8.6 離子強度0.05M的巴比妥緩沖液配置：
巴比妥鈉 10.3 g
巴比妥 1.84 g
蒸餾水 1000 ml
3. 緩沖瓊脂板 將純化的瓊脂用pH8.6離子強度0.025mol的巴比妥緩沖液（用0.05mol的巴比妥緩沖液稀釋一倍即可）配成1.5%的瓊脂，加入0.01%~0.02%流柳汞防腐，保存冰箱內備用。
4. 其他 電泳儀、生理鹽水、打孔器、微量進樣器、載玻片。
【實驗方法與步驟】
1.瓊脂板制備 以pH8.6離子強度0.05mol巴比妥緩沖液配成1%～1.5％瓊脂凝膠板，厚度2～3mm。
2. 打孔 瓊脂冷卻后，打成對的小孔數列，孔徑0.3～15px，孔距0.4～25px。挑去孔內瓊脂，封底。
3. 加樣 一對孔中，一孔加已知（或待測）抗原，另一孔加待測（或已知）抗體。
4. 電泳 將抗原孔置于負極端。電壓2.5～6V／cm，或電流強度3～5mA/cm，電泳時間30～90min。
電泳結束后，將玻板置于燈光下，襯以黑色背景觀察。陽性者則在抗原抗體孔之間形成一條清楚致密的白色沉淀線。如沉淀線不清晰，可把瓊脂板放在濕盒中37℃數小時或置電泳槽過夜再觀察。
【注意事項】
1． 抗原抗體濃度的比例 當抗原抗體比例不適合時，均不能出現明顯可見的沉淀線。所以除了應用高效價的血清外，每份待測樣品均可做幾個不同的稀釋度來進行檢查。
2． 特異性對照鑒定 為了排除假陽性反應，則在待檢抗原孔的鄰近并列一陽性抗原孔，若待檢樣品中的抗原與抗體所形成的沉淀線和陽性抗原抗體沉淀線完全融合時，則待檢樣品中所含的抗原為特異性抗原。
3． 適當的電滲作用在對流免疫電泳中是必要的 當瓊脂質量差時，電滲作用太大，而使血清中的其他蛋白成分也泳向負極，造成非特異性反應。在某些情況，瓊脂糖由于缺乏電滲作用而不能用于對流免疫電泳。
4． 當抗原抗體在同一介質中帶同樣電荷或遷徙相近時 則電泳時兩者向著一個方向泳動。故不能用對流免疫電泳來檢查。