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  • 發布時間:2022-05-10 14:20 原文鏈接: 尿激酶的檢查

    1 溶液的澄清度與顏色

    取本品,加0.9%氯化鈉溶液制成每1ml中含3000單位的溶液,依法檢查(2010年版藥典二部附錄Ⅸ A和B),應澄清無色。

    2 分子組分比

    取本品,加水溶解并制成每1ml中含2mg的溶液后,加入等體積的緩沖液(取濃縮膠緩沖液2.5ml、20%十二烷基硫酸鈉溶液2.5ml、0.1%溴酚藍溶液1.0ml與87%甘油溶液3.5ml,加水至10ml),置水浴中3分鐘,放冷,作為供試品溶液;取供試品溶液10μl,加至樣品孔,照電泳法(2010年版藥典二部附錄Ⅴ F第五法考馬斯亮藍染色)測定,按下式計算高分子量尿激酶相對含量(%)。

    3 干燥失重

    取本品,以五氧化二磷為干燥劑,在60℃減壓干燥至恒重,減失重量不得大于5.0%(2010年版藥典二部附錄Ⅷ L)。

    4 乙肝表面抗原

    取本品,加0.9%氯化鈉溶液制成每1ml中含10mg的溶液,按試劑盒說明書項下測定,應為陰性。

    5 異常毒性

    取本品,加氯化鈉注射液制成每1ml中含5000單位的溶液,依法檢查(2010年版藥典二部附錄Ⅺ C),按靜脈注射法給藥,應符合規定。

    6 細菌內毒素

    取本品,依法檢查(2010年版藥典二部附錄Ⅺ E),每1萬單位尿激酶中含內毒素的量應小于1.0EU。

    7 凝血質樣活性物質

    (1)血漿的制備 取新鮮兔血,加入3.8%枸櫞酸鈉溶液(每9ml兔血加3.8%枸櫞酸鈉溶液1ml),混勻,在2~8℃條件下,以每分鐘5000轉離心20分鐘。取上清液在-20℃速凍保存備用,用前在25℃融化。

    (2)測定法 取本品,加巴比妥緩沖液(pH 7.4)溶解并稀釋制成每1ml中各含5000單位、2500單位、1250單位、625單位與312單位的供試品溶液。若供試品中含乙二胺四醋酸鹽或磷酸鹽,必須先經巴比妥緩沖液(pH 7.4)在2℃透析除去,再配成上述濃度的溶液。

    取小試管(12mm×75mm)7支,在第1管和第7管各加入巴比妥緩沖液(pH 7.4)0.1ml作空白對照,其余5管分別加入上述倍比稀釋的供試品溶液各0.1ml,再依次加入6-氨基己酸溶液[取6-氨基己酸1.97g,加巴比妥緩沖液(pH 7.4)使溶解,并稀釋至50ml]和血漿各0.1ml,輕輕搖勻,在25℃水浴中,靜置3分鐘,加入已預溫至25℃的氯化鈣溶液(取氯化鈣1.84g,加水使溶解并稀釋至500ml)0.1ml,混勻,放入水浴,并立即計時。注意觀察血漿凝固,終點判斷為輕輕傾斜試管置水平狀,溶液呈斜面但不流動,記錄凝固時間(秒)。每種濃度測3次,求平均值(3次測定中最大值與最小值的差不得超過平均值的10%)。以供試品溶液濃度的對數為縱坐標,復鈣縮短時間(空白管的凝固時間減去供試品管的凝固時間)為橫坐標繪圖。連接不同稀釋度的供試品各點,應成一直線,延伸直線與縱坐標軸的交點為供試品濃度,即凝血質樣活性為零值時的供試品酶活力,按每1ml供試品溶液的單位表示,每1ml應不得少于150單位。


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