徠卡熒光顯微鏡鏡檢術的樣品制作以及注意事項

在徠卡熒光顯微鏡中樣品的制作與一般制片方法相同，但以新鮮材料為好，否則材料經各個制片步驟處理后，往往使固有熒光增強或消失，其要求：

1.在徠卡熒光顯微鏡中不要用本身能產生熒光的藥劑，一般用酒精，甲醛作固定劑，但時間不宜過長（甲醛能使組織發出青綠一青白色熒光；酒精、苯、丙酮等時間一長可使熒光物質大量溶出；苦味酸本身有固熒光，不能使用），甲醛以甲醛氣進行固定為好。

2.在徠卡熒光顯微鏡中切片不能太厚，約在10nm左右，尤以透射式熒光鏡檢時要求更甚。

3.在徠卡熒光顯微鏡中在徠卡熒光顯微鏡中蛋白粘貼劑不能用以熒光色素處理的材料，因蛋白能為熒光色素染色，而發生附加熒光。

4.在徠卡熒光顯微鏡中如為石蠟制片，脫蠟必須徹底，因石蠟有青色熒光，切片進入水后，應充分水洗，再經螢光色素處理，用水封固進行鏡檢。

5.在徠卡熒光顯微鏡中載玻片，蓋玻片為螢石玻璃制成，如為普通玻璃，要色澤潔白，厚度要符合標準。同時不能有灰塵及有機物質，否則將會發生熒光而干擾正常的鏡檢效果。

在徠卡熒光顯微鏡鏡檢過程中注意事項：

1.激發光長時間的照射，會發生熒光的衰減和消失現象，因此盡可能縮短時間，暫時不觀察時，應用檔板遮蓋激發光源。

2.作油浸觀察時，應用“無熒光油”，尤其是在U、V激發時因香柏油帶有青色熒光。

3.熒光幾乎都較微弱，應在較暗的室內進行，新型的目鏡帶有遮光罩，拔出可遮擋外來光的干擾。