微生物培養基手冊大全

微生物培養基種類大全:

1、營養瓊脂（普通瓊脂)
成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏湯) 100毫升
   瓊脂（視天氣，瓊脂質量而定)
制法：將上物加熱溶解，補足水，調ph至7．6，過濾分裝121℃，高壓滅菌15分鐘。
用途：作普通瓊脂平皿。

2、血瓊脂平板（BA)
制法：取營養瓊脂（PH7．6)，加熱使其溶解待冷至45-50℃，以滅菌操作于每100毫升營養瓊脂加滅菌脫纖維羊血或兔血5-10毫升,輕輕搖勻，立即傾注于平板或分裝試管，制成斜面備用。
用途：1． 一般棉拭子均接種此培養基。
   2．尿液，膿液
   3．分離細菌標本用。

3、基礎培養基 （肉膏湯BB)
成份：蛋白胨 10克     牛肉膏 5克 
   氯化鈉 5克     水     1000毫升
制法：將以上各物稱好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7．6，過濾分瓶，121℃高壓滅菌，20分鐘備用。
用途：1 作耐藥試驗，增菌用分裝小管。
   2 作普通瓊脂斜面。

4、血液培養基（大管肉湯培養基)
成份：1 新鮮牛肉浸液 1000毫升 
   2 PABA（對氨基苯甲酸〔相當于10mg/毫升〕) 1g% 1毫升
   3 MgSO4 [相當于0．493/100毫升]    49．3% 1毫升
   4 枸椽酸鈉                      0．3g
制法：1 將1號，4號混合液，2號，3號液分裝高壓滅菌。
   2 取滅菌1，4號混合液用無菌法加入PABA，MgSO4，再分管，行無菌試驗三天方可使用。
用途：作血，骨髓培養用。

5、腸道桿菌培養基（伊紅美蘭瓊脂)
成份： 蛋白胨 10克       乳糖     10克
       氯化鈉 5克       瓊脂     25（22)克
       水    1000毫升     2%伊紅溶液20毫升
       0．5%美蘭溶液 20毫升
制法：將蛋白胨，氯化鈉瓊脂稱好，加水1000毫升使溶解，校正PH7．4過濾，補足失水，加入2%伊紅溶液20毫升，0．5%美蘭溶液20毫升，（115℃高壓20分鐘)，冷卻至50℃左右傾注平板，凝固后存冰箱備用。（高壓以后方可再加乳糖)

用途：用作分離沙門氏，志賀氏菌屬，也作菌群調查。
                         1

6、羅文斯坦培養基
成份：磷酸二氫鉀     2．4克       硫酸鎂 0．24克
   枸椽酸鈉    0．6克       天門冬素 3．6克
   純甘油（丙三醇) 12毫升       水     600毫升
   馬鈴薯粉    30克           雞蛋 1000毫升（約3公斤)
   2%孔雀綠水溶液 20毫升    
制法：1 除雞蛋外（還有孔雀綠)。可將其它物品稱好，放入大三角瓶包扎好，高壓滅菌。
   2 雞蛋用75%酒精泡30分鐘，滅菌法打蛋，倒入盛有玻璃珠的滅菌三角燒瓶內充分將雞蛋搖散。
   3 將各成份按比例配好，分裝每管約5毫升。
   4 間歇滅菌第一次90℃1小時，第二次80℃半小時，第三次80℃半小時（或放85℃烤箱內連續二次)。
質控標準： 1 滅菌試驗合格。
         2 接種結核桿菌要求兩星期生長良好。
用途：作結核分枝桿菌培養用。

7、結核半固體培養基
成份：磷酸氫二鈉    19克           硫酸鎂     0．6克
   磷酸二氫鉀    2．5克       天門冬素 5克
   1%孔雀綠    1．5克           甘油    20毫升
   吐溫80（10%) 5毫升           水    1000毫升
   枸椽酸鈉       2．5克           動物血清 100毫升
   瓊脂           1．5克（80小時用甲醇去脂)
   1%孔雀綠    0．78毫升    吐溫80（10%) 5毫升
   加動物血清     100毫升
制法： 1 除血清外將上述藥品均稱好，放入煮沸溶解，調PH7。2
   2 分管（每管約10毫升)包扎好，高壓，121℃半小時滅菌。
   3 待冷后無菌法加無菌血清（綿羊血或兔血)每管約1毫升備用。
   4 去除瓊脂方法：取瓊脂若干或于三角燒瓶中加甲醇于瓊脂1毫升用塞密封，放37℃溫浴80小時，每天搖動一次，冷卻后到時取出用濾紙過濾，待瓊脂自然冷卻后備用。
質控標準：1無菌實驗合格。www.med126.com
      2瓊脂硬度合適而清亮。
      3接種標準結核桿菌用，強度合適即可用。
用途：培養結核桿菌用。

8、亞碲酸鉀血瓊脂平板
成份：瓊脂基礎 100毫升    1 0%葡萄糖     2毫升
   1%亞碲酸鉀 4．5毫升    綿羊血    10毫升
制法：1將瓊脂基礎溶解好，加入羊血。
   2馬上加熱使成咖啡色后，稍冷再加入10%葡萄糖2毫升與1%亞碲酸4．5毫升混合后倒入無菌平板，凝固后存冰箱備用。
質控標準：接種白喉桿菌生長良好，其它革蘭氏陰性菌均抑制生長。
用途：供培養及鑒別白喉桿菌用。    
                     
9、米培養基
成份：白米    20克           水     1000毫升
   瓊脂    20克       吐溫80 10毫升
制法：1將20克米加水200毫升煮沸45分鐘，煮時將容器蓋好。
   2用紗布過濾，只要米湯，不要飯，加水至1000毫升。
   3加瓊脂20克，吐溫-80 10毫升煮溶，分裝中型管（每管約3毫升)，包扎好，高壓，121℃半小時，消毒備用。
質控標準：1滅菌。
      2要求清亮。
      3接種白色念珠菌17-24小時生長良好，并產生厚膜孢子。
用途：培養白色念珠菌用。

10、蛋白胨水培養基
成份：蛋白胨 1克    氯化鈉     0．5克
   水加至 100毫升     PH調至     7．8
制法：把以上各物稱好溶于水，調節PH7．6分裝消毒備用。
質控標準：1 放置37℃無菌生長。
      2 接種大腸桿菌24小時生長良好。
      3 可作中國蘭平板基礎液。
      可作靛基質基礎液（作此試驗需要色氨酸蛋白胨)。

11、血培養基
成份：蛋白胨 10克           牛肉膏     5克
   氯化鈉 5克           葡萄糖     3克
   枸椽酸鈉 3克           MgSO4。7H2O 20毫升
   0．5%PABA 10毫升     酵母浸液 10毫升 0．2克（2%過濾)
   *酚紅0．4% 6毫升    水     1000毫升
       瓊脂     0．5克    
*：作大BB，小BB時，不要加酚紅和瓊脂。
制法：1、除PABA、硫酸鎂、酚紅外均稱好煮化調PH7．4
   2、調好PH后再加酚紅。
   3、硫酸鎂、PABA另外無菌再加入（亞細，小BB)

12、沙氏培養基
成份：蛋白胨     1克                       水     100毫升
   瓊脂     1．5克（瓊脂粉1克%)     葡萄糖或麥芽糖 4克
                        
制法：1將上述物質稱好，放入水中煮沸溶解（不必調PH即有5左右)分中號試管（約4毫升)包扎，高壓115℃20分鐘。
   2 趁熱斜好，凝固備用。
質控標準：1無菌試驗合格。
      2接種霉菌比在其它培養基上生長良好，其它菌生長不好。
用途：作分離培養霉菌用。
注意：1 接種臨床新鮮標本可先加1-2滴70%酒精讓干后再接種于含12．5%氯霉素沙氏斜面培養基上。 
   2 也可用蜂蜜8克代替葡萄糖或麥芽糖。

13、肉渣培養基
成份： 牛肉渣       牛肉浸液（牛肉膏)
制法：將做牛肉浸液的牛肉渣，裝入試管，高約3毫米，加入牛肉浸液或牛肉膏湯（PH7．6)約5毫升，比肉渣高一倍，液面上加入已溶解的凡士林，高約0．5厘米（不加也可)，121℃高壓滅菌20-30分鐘后保存于冰箱內備用 。
用途：用于厭氧菌培養。
注意：如無肉渣也可用牛、羊血等代替，將血塊先放入水內煮沸，取出成小塊，血塊在加熱后搖勻成碎顆粒狀。

14、單糖發酵管培養基（半固體)
   成份： PH7．6-7．8蛋白胨水 1000毫升（0．3克/100毫升)
      1.2%酚紅液    0．4毫升
      瓊脂          0．4 - 0．5克
      10%糖或醇       10毫升
制備：把蛋白胨水，瓊脂加熱溶解，然后加1．2%酚紅液0．4毫升，10%糖10毫升，混勻，分裝試管，每管約2-3毫升，經115℃高壓滅菌20分鐘后，分置于試管架上，貼上各類糖或醇類標簽備用。
質控標準：細菌發酵糖類或醇而產生酸，能使培養基PH改變，指示劑由紅變黃色，如因發酵產生氣體則半固體內產生氣泡，如有動力則半固體由清亮變混濁。

15、明膠培養基
成份：肉浸液     1000毫升（牛肉浸膏5克)
   明膠    12克
制法：
   100毫升肉浸液中，加入明膠12克，隔水加熱煮化，校正PH7．2，分裝小號試管，用阿諾氏間歇滅菌80℃30分鐘，連續3日，或者108℃高壓20分鐘，冷卻，貯存備用。

15-1、堿性蛋白胨水
成份：
   蛋白胨     20克           氯化鈉     5克
   硝酸鉀     0．1克    結晶碳酸鈉（NaclCO3．12H2O) 0．2克
   水    1000毫升
制法：將蛋白胨，Nacl，硝酸鉀，結晶碳酸鈉稱好，溶于1000DW中，校正PH8．4分裝試管，121℃高壓滅菌15分鐘后備用 。
用途：用于霍亂弧菌培養。
                     
16、葡萄糖蛋白胨水（M。V用)
成份：蛋白胨     5克       葡萄糖    5克
   K2HPO4     5克       水    1000毫升
制法：將上述稱好溶解分裝試管，調PH7．4高壓滅菌115℃ 滅菌20分鐘 ，或者葡萄糖加熱煮沸后再倒試管
標準：滅菌試驗合格。接種大腸桿菌VP陰性，M陽性；接種產氣桿菌VP陽性，M陰性。
用途：作鑒別腸道桿菌用。

17、枸椽酸鹽培養基
成份：磷酸二氫銨 0．1克    硫酸鎂     0．02克
   磷酸氫二鉀 0．1克    枸椽酸鈉 0．23--0．5克（0．36)
   氯化鈉     0．5克    瓊脂     1．5克
   0．5%溴麝香草酚蘭2毫升 （調PH6．8再加)
制法：將上述稱好，放入水中煮沸溶解，調PH6．8，然后分裝中號試管，高壓滅菌，趁熱倒呈斜面，凝固
后備用。
標準：1、滅菌試驗合格，培養基呈果綠色適宜。
   2、接種大腸桿菌，培養基上不生長，也不變色。
   3、接種產氣桿菌，培養基呈深蘭色。
用途：作鑒別大腸桿菌用。

18、雙糖鐵培養基
成份：
   下層：蛋白胨 1克       氯化鈉     0．5克 
   葡萄糖 0．2克    瓊脂     0．3-0．5克
   水     100毫升
將上述物質混勻調PH7．6后加1．2%酚紅0．4毫升
   上層：蛋白胨 1克    氯化鈉     0．5克
   乳糖     1克    硫代硫酸鈉 0．03克
   硫酸亞鐵 0．02克     瓊脂    1克
   水     100毫升
制法： 1將下層配好，分裝中號試管（1毫升)，塞好包扎，15磅高壓滅菌半小時，使凝固后備用。
       2制上層時，先將蛋白胨水制好，加入硫酸亞鐵，硫代硫酸鈉，加熱溶解PH8．1，再加入酚紅分瓶，（每瓶300毫升，稱取瓊脂包扎滅菌，趁熱加入乳糖隔水煮沸30分鐘或112℃消毒15分鐘)。
       3取已制的下層管，每管用無菌法倒入上層液約1。5毫升，邊斜放置使成斜面，凝固后備用。
標準：無菌試驗合格，接種大腸桿菌下層產酸產氣，上層產酸。

19、尿素培養基
成份：蛋白胨     0．1克    氯化鈉     0．5克
   磷酸二氫鉀 0．2克    尿素     0．2克（或10%2毫升)
   葡萄糖     0．01克（或10%葡萄糖0．1毫升)
   H2O     100毫升    酚紅（0．2%) 0．4毫升
制法：1除葡萄糖，尿素外把其它藥品稱好放入水中煮沸，使溶解，調PH7．2過濾，15磅高壓滅菌15分鐘．
      2配制尿素（滅菌)液：每100毫升基液內加2毫升．
      3配制10%葡萄糖（滅菌)每100毫升加0．1毫升．
      4分裝小試管待用．
標準：
   1滅菌試驗合格．
   2接種變形桿菌24小時呈紅色．
用途：鑒定變形桿菌用．

20、膽鹽中性紅瓊脂
成份：蛋白胨瓊脂PH7．2-7．4     5000毫升
   膽 鹽                       2．5克
   乳糖                      5．0克
   對氨基苯甲酸             25毫克
   1%中性紅溶液             25毫升
制法：
   將膽鹽，對氨基苯甲酸，乳糖趁熱加入已滅菌之蛋白胨瓊脂中，待冷至50-60℃時，加入1%中性紅液2．5毫升，混合后即傾注平皿，凝固待用．
*：1%中性紅：1克中性紅加酒精60毫升，加水40毫升

21、丙二酸鹽培養基（縮蘋果酸鈉)
成份：丙二酸鈉     0．3克     酵母浸膏     0．1克
   Nacl    0．2克     硫酸銨    0．2克
   K2HPO4     0．06克     KH2PO4    0．04克
   水       100毫升
   PH6．8，高壓滅菌備用．
   0．2%溴麝香酚蘭乙醇 1．25毫升
制法：與枸椽酸鹽利用試驗相類似，是測定細菌能否利用丙二酸鹽與碳源．無機銨鹽為氨源而生長，生長者使培養基變成堿呈蘭色．
鑒定： 克氏桿菌 （+)       赫夫尼亞 （+)
       沙門氏菌     （—)    痢疾桿菌     （—)