植物徒手切片與植物細胞結構觀察

[目的要求]

1.掌握植物  徒手切片技術。

2.觀察認識植物細胞的基本結構，質體的形態。

3.認識和鑒定植物細胞內常見的后含物。

[材料用品]

材料：洋蔥鱗莖或番茄果實、葫蘆蘚葉、紅辣椒、鴨跖草葉片、馬鈴薯塊莖、蓖麻種子、花生種子。

用品：I-KI溶液、蘇丹溶液、顯微鏡、解剖針、鑷子、雙面刀片、載玻片、吸管、蒸餾水等。

[方法與步驟]

一、植物徒手切片

(一)選材

一般選擇正常、軟硬適中的植物器官或組織為材料，所取的新鮮材料應及時放入水中，以免徒手切片時萎蔫。材料太硬時，可用1.5%的氫氟酸或用甘油和70%酒精的等量混合液進行軟化處理;材料太軟時，可用馬鈴薯塊莖、胡蘿卜肉根等作支持物，把材料夾在其中進行切片。對有些植物的葉片可卷成筒狀進行切片或用三片雙面刀片制成簡易的“切刀”進行切片。取材的大小，一般直徑不超過5mm，長度以15-25mm為宜。

(二)切片

1.把欲切的材料用刀削成大小適宜的段塊，并將切面削平，然后將材料和刀片蘸水濕潤(以后每切一片都要用水濕潤)。

2.用左手的拇指、食指和中指夾住材料。為防止切片時割傷手指，應使材料上端(切面)略高與食指，拇指略低于食指。用右手的拇指和食指捏住刀片一端，置于右手食指之上，刀片和材料切面平行，刀刃放在材料左前方稍低于材料斷面的位置。

3.以均勻的力量和平穩的動作使刀刃自左前方向右后方斜滑拉切，注意不要直切，中途不停頓，拉切速度要快，不要推前拖后(拉鋸式)切割，左手食指向下稍微移動，使材料略有上升，從而調動每張切片的厚度。切片過程中右手不動，只是右臂移動，動作用臂力而不用腕力。

4.切片要薄、平而完整，將切下的切片用毛筆刷蘸水從刀片上輕輕移入培養皿的清水中或直接將刀片浸沒于水中使切片漂洗下來

(三)臨時裝片制作

同上節課方法。

二、植物細胞的基本結構

(一)制作臨時裝片

首先將載玻片、蓋玻片用紗布拭擦干凈，拭擦玻片動作要輕，手指用力要均勻，否則易拭破。在載玻片中央，滴加一、二滴清水，然后撕取洋蔥鱗莖肉質鱗片葉上表皮(近軸面)一小塊放水滴中，用解剖針展開后，將蓋玻片輕輕蓋上，蓋蓋玻片時，用鑷子夾起蓋玻片，使載玻片一邊先放下，接觸一邊水，然后再輕輕放平，以免水中產生氣泡，影響觀察。如仍有氣泡，可用鑷子加壓蓋玻片，將氣泡趕出。如水分過多，可用濾紙條將水吸干，如水分不足，可在蓋玻片邊沿用滴管加水少許。使材料浸沒水中，蓋玻片緊貼載玻片，這樣裝片制成。

(二)觀察

臨時裝片制成后，置顯微鏡下觀察。先在低倍鏡下觀察細胞的形態結構及排列狀態，然后在蓋玻片的一邊加上一滴I-KI溶液，用濾紙條在另一邊吸引溶液，使細胞染色。結果細胞被染成棕黃色，然后轉換高倍鏡觀察。

洋蔥表皮細胞排列整齊，呈長方形，每一個細胞周圍有明顯的界限，這就是細胞壁。細胞壁里面為原生質體，其中有一個染色較深，呈黃色的小圓球體為細胞核  。幼嫩細胞，核居中央，細胞核與細胞壁之間為細胞質，在成熟細胞中。細胞中央形成中央大液泡，染色較淺。細胞質成一薄層緊貼細胞壁，細胞核也由中央移向邊位，表皮細胞初看好象是一個平面的，但在高倍鏡下，慢慢調節細準焦螺旋，就可看到細胞的上壁或下壁，說明細胞是立體的。

用鑷子或者解剖針挑取少許成熟番茄果肉，制成臨時裝片。置低倍鏡下觀察，細胞圓球形，呈分散狀態，細胞形狀和排列與洋蔥表皮細胞不同，也可清楚地看到細胞壁、細胞核、細胞質和液泡，其基本結構與洋蔥表皮細胞是相同的。

三、質體的觀察

1.葉綠體

用鑷子攝取新鮮葫蘆蘚葉片，作臨時裝片。置顯微鏡下觀察，可見細胞中有很多綠色顆粒，這就是葉綠體。

2.雜色體

從紅辣椒果實上切一小薄片，或取一小塊辣椒，用刀片刮去果肉。置載玻片下，加一滴清水。蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察。細胞中有許多紅色小顆粒，這就是雜色體。雜色體分散在細胞質中。

3.白色體

撕取鴨跖草葉表片一小塊，做成裝片。置顯微鏡下觀察，在細胞核周圍可以看到許多透明小粒，即為白色體。

四、植物細胞內的幾中后含物

1.淀粉粒：

取馬鈴薯塊莖做徒手切片，置于載玻片上加水兩三滴，放在顯微鏡下觀察，細胞內有許多顆粒，注意它們的形狀，大小與位置若光線調節得當，可以看到顆粒上具有輪紋。每一個顆粒即一淀粉粒，加一滴稀薄的I-IK溶液，注意淀粉粒被染成什么顏色?

2.貯藏蛋白質：

將蓖麻種子進行徒手切片，選取幾片薄的置95%酒精中，以便溶解切片中的脂肪。然后取一片于載玻片中，滴加I-IK，置顯微鏡下觀察。在薄壁細胞中可看到被染成黃色的圓形或橢圓形的糊粉粒。轉換高倍鏡，觀察糊粉中球狀體及蛋白質結晶體。

3.脂肪

取花生子葉做徒手切片，置載玻片上，加幾滴蘇丹Ⅲ溶液。靜置十分鐘，然后蓋上蓋玻片，吸去多余的染液，置顯微鏡下觀察，尋找較薄的地方，見細胞內有許多被染成桔紅色的小圓球，這便是脂肪球。

五、胞間連絲的觀察：

用刀片沿新鮮的紅辣椒的果皮表面平行方向，切取一薄片(或把辣椒的果皮面朝上平放桌面上，用快刀刮去肥厚物質，使之很薄)，加碘液染色制片觀察。在高倍鏡下，可見其表皮是由不太規則的細胞群構成的，細胞中有著淡黃色的細胞質。細胞壁很厚，著深黃色，壁上有小孔(紋孔)，孔里有細胞質絲穿過。