植物組織培養基母液配制的若干關鍵環節

植物組織培養（plant tissue culture）是指植物的任何器官、組織或細胞，在人工預知的控制條件下，放在含有營養物質和植物生長調節物質等組成的培養基中，使其生長、分化形成完整植株的過程.植物組織培養具有取材少，培養材料經濟；人為控制培養條件，不受自然條件影響；生長周期短，繁殖率高；管理方便，利于自動化控制等特點.因而被廣泛應用于各種植物的快速繁殖之中.

培養基母液，也叫濃縮貯備液.它是以培養基配方配制成的高倍的濃縮液，不同組分母液，它的濃縮倍數不同，一般最低為10倍，高的有50倍、100倍、200倍，甚至1000倍.母液是一個方法比較簡便、用量比較準確且被廣泛采用的配制方法.本文就如何掌握培養基母液配制的操作要領作一闡述，以供參考.

以MS培養基為例，其母液的配制包括大量元素、微量元素、鐵鹽、維生素、氨基酸、植物生長調節物質和有機附加物等種類.(見表1)

表1 MS培養基母液的配制

1 大量元素和微量元素母液的配制

按規定用量,稱取所需的各種藥品，在配制時為減少工作量，可以把幾種藥品（如大量元素或微量元素）配在同一母液中（見表1）.但由于各種藥品的混合，可能發生反應，生成沉淀物，以致母液失效.為避免類似現象發生，在大量元素、微量元素和維生素及氨基酸的母液配制時，可采用如下2種做法加以解決：①將要配在同一母液的大量元素、微量元素和維生素及氨基酸等化合物，按“表1”所列藥品的先后順序溶解藥品，待前一種藥品完全溶解后再加入后一種化學藥品，以此類推；②使每種成份分別完全溶解，再把它們彼此混合.

2 鐵鹽母液的配制

鐵鹽的成份含硫酸亞鐵（FeSO4·7H2O）和乙二胺四乙酸二鈉（Na2-EDTA）.這兩種化合物的溶解和混合較為嚴格，必須按如下方法配制，否則將會產生沉淀.該方法是：分別溶解FeSO4·7H2O和 Na2-EDTA，加熱并不斷攪拌，使之完全溶解，冷卻，將2種溶液混合，調PH至5.5，用蒸溜水加至所需容積，棕色瓶保存于冰箱之中.

3 植物生長調節物質母液的配制

植物生長調節物質是培養基的重要組分之一，一般是植物激素類物質，如生長素類的IAA、IBA、NAA，赤霉素類的GA3，細胞分裂素類的2，4-D、KT和6-BA等.由于大多數生長調節物質難溶于水，因此配制方法也各不相同：①IAA，IBA和GA3先用少量95%酒精溶解，再加水定容，搖勻后貯于試劑瓶中、貼上標簽后，存放在冰箱中；②NAA可用熱水或少量95%酒精溶解，再加水定容至所需容積；③2，4-D可溶于少許1mol·L-1的NaOH溶液中，然后加水定容；④KT和6-BA可用少量1mol·L-1的HCl溶解，再加水定容；⑤玉米素先溶于少量95%酒精中，然后加水定容.

植物生長調節物質濃度通常用ppm（mg·ml-1）和mol·L-1表示，在配制母液時，常以ppm較為方便，一般配制成0.5ppm的母液，這個濃度既便于計算，也可避免冷藏時形成結晶.

4 有機附加物母液的配制

在植物組織培養時，培養基中往往要加入一些有機附加物，如椰子汁，以促進組織培養活性.由于椰子汁的活性成分是耐熱的，在配制時，要先把由果實中采集到的汁液加熱煮沸以除去其中的蛋白質，過濾，然后置塑料瓶中貯存于的-200c的低溫冰箱內。