實驗方法原理 將植物組織放入一系列濃度遞增的蔗糖或甘露醇溶液中,經過一定的時間使達到滲透平衡后,細胞在其中發生臨界質壁分離的溶液滲透勢即等于細胞液的滲透勢。此溶液稱為等滲溶液,其濃度稱為等滲濃度。實際測定時,根據引起臨界質壁分離的溶液濃度與相鄰的不引起質壁分離的溶液濃度的平均值,求出等滲濃度,并計算出此溶液的滲透勢,即為細胞的滲透勢。
實驗材料 洋蔥鱗莖紫鴨趾草葉片
儀器、耗材 顯微鏡刀片移液管培養皿鑷子
實驗步驟
一、材料和設備
植物材料:洋蔥鱗莖,紫鴨趾草葉片。
設備:顯微鏡、刀片、移液管、直徑6 cm 培養皿、鑷子。
試劑:1.00mol蔗糖溶液或甘露醇溶液。
二、實驗步驟
1、以1.00 mol 的蔗糖溶液為母液,用蒸餾水稀釋成0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60 mol 溶液,搖勻后備用。
2、用刀片在洋蔥鱗莖內表皮上劃出邊長為2-5mm的小方格,用鑷子剝取表皮。注意撕下的表皮的厚度要適當。
3、自高濃度的溶液開始,每隔一定時間(如3min),依次向濃度遞減的蔗糖溶液中放入4-5片表皮塊(表皮撕下立即投入溶液中),使表皮完全浸入溶液。15-20min后,從最高濃度的蔗糖溶液開始,按原來放入的順序取出表皮;在載玻片上滴1-2滴相應濃度的蔗糖溶液,放顯微鏡下觀察幾個視野,記錄并計算質壁分離的情況。找出引起50%左右的細胞原生質剛剛從細胞壁的角隅處與細胞壁分離的蔗糖溶液濃度;以及不足50%的細胞發生質壁分離或不產生質壁分離的蔗糖的最高濃度。
4、重新配制上述結果的兩種濃度的蔗糖溶液,用新的表皮重復實驗1-2次,直到實驗結果符合要求。這兩種蔗糖溶液滲透勢的平均值即為細胞液的滲透勢。
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