| 實驗步驟 | 一、實驗材料和實驗用品
植物幼嫩組織（如幼葉、花器、幼根等）。
離心機、離心管、紫外分光光度計、微量移液器、吸頭、吸水紙、水浴鍋、冰箱、研缽、液氮罐、電子天平、pH計、高壓滅菌鍋、一次性手套和口罩、電泳儀及電泳槽。
CTAB提取液：2%CTAB（m/V）, 100mmol/L Tris-HCl pH8.0, 20mmol/L EDTA pH8.0, 1.4mol/L NaCl, 2% PVP(滅菌后加入2% PVP, 使之充分溶解)。在研磨植物幼嫩組織前加入1%(V/V)β-巰基乙醇。
TE（pH8.0）:稱取1.211 g Tris, 0.372 g EDTA-Na2, 先用800 mL蒸餾水加熱攪拌溶解，用鹽酸調pH8.0，再用蒸餾水定容至1000 mL。高壓滅菌20 min。
氯仿/異戊醇（24:1, V/V）: 將氯仿和異戊醇按體積24:1的比例混勻，置棕色瓶中，4℃保存。
酚/氯仿/異戊醇（25:24:1）: 按飽和酚、氯仿、異戊醇體積比為25:24:1比例混勻，置棕色瓶中，4℃保存。
10 mg/L 的EB貯存液：在100 mL蒸餾水中加入 1g EB, 在磁力攪拌器上攪拌數小時，使其完全溶解，轉至棕色瓶中避光4℃保存。EB是強誘變劑，稱量時要戴手套和口罩。一旦接觸了EB，立即用大量水沖洗。
1X TAE電泳緩沖液：50X TAE濃縮貯存液含Tris堿242 g，冰醋酸57.1 mL, pH8.0 的0.5 mol/L EDTA 100mL, 加600 mL蒸餾水，在磁力攪拌器上攪拌，最后加蒸餾水定容至1000 mL。
6X凝膠加樣緩沖液：0.25%溴酚藍，0.25%二甲苯青FF，40%(m/V)蔗糖水溶液，4℃保存。
3M NaAc（pH5.2）
二、實驗內容和實驗步驟
1．提取DNA
（1）提取DNA所用的提取液、吸頭、離心管等需要在高壓滅菌鍋中121℃（約1.1 kg/cm2）高壓滅菌20 min。
（2）用液氮將50mg 幼嫩葉片研磨成細粉，置于1.5ml 離心管中加入預熱至65℃的600μl 的CTAB提取液，輕搖混勻。
（3）65℃水浴1小時，其間輕搖混勻。
（4）12000rpm離心10min，取上清轉移至另一1.5ml 離心管中。
（5）向上清液中加入等體積的酚/氯仿/異戊醇（25：24：1），輕輕混勻10min，然后12000rpm離心10min，再轉移上清入新管。
（6）向上清液加入等體積的氯仿/異戊醇（24：1），輕輕混勻10min，然后12000rpm離心10min，再轉移上清入新管。
（7）向上清液中加1/10體積的3M NaAC (pH5.2)，等體積的冷異丙醇，小心混勻。12000rpm離心10min，棄上清。
（8）用70%乙醇洗滌沉淀一次，12000rpm離心，棄上清。
（10）將沉淀在超凈工作臺上吹干，加50μl TE (pH8.0)室溫溶解。
電泳檢測或用紫外分光光度計檢測DNA的濃度和質量。
2．濃度測定
（1）瓊脂糖電泳法檢測DNA
根據上樣管的數量和電泳槽的大小估算瓊脂糖膠的體積，稱取瓊脂糖干粉用1xTAE緩沖液配制1%的瓊脂糖凝膠，配制時在電爐上加熱使瓊脂糖充分溶解，待溫度降至60℃，加入EB, 使EB的終質量濃度為1 μg/mL，搖勻，倒入帶有梳子的膠床中，避免產生氣泡，室溫下約30 min，膠自然凝固。
把瓊脂糖膠放入電泳槽中，倒入1X TAE電泳緩沖液使液面高出膠面約0.5 cm。
移液器插上10μl吸頭，吸入DNA樣品和上樣緩沖液的混合液后，尖端插入加樣孔底部，緩慢把DNA樣品加入到加樣孔中。
加樣完畢后，正確連接電泳槽和電源，黑線接陰極。紅線接陽極，打開電源，正確設定電壓及時間，時間的選擇取決于膠的長度和電壓大小。一般不高于5 V/cm的電壓，電泳約2 h，待溴酚藍離膠邊約1-1.5cm時停止電泳。
小心取出凝膠，置于紫外透射儀上，紫外燈下檢測擴增片段的有無及分離情況，在凝膠成像儀上照相。
用λDNA做相對分子質量大小的Marker，如果帶型不彌散，在與Marker 20kb 的帶的相應位置出現整齊明亮的條帶，說明基因組DNA完整，沒有降解。
（2）紫外分光光度法測定DNA的濃度
取少量待測的DNA樣品，用TE或蒸餾水稀釋50倍（或100倍）。
用稀釋液做空白，在260 nm、180 nm 、310 nm處調節紫外分光光度計的讀數至零。
加入待測DNA樣品在上述3個波長處讀取OD值。
純DNA樣品的OD260/OD280值大約為1.8，高于1.8有可能有RNA污染，低于1.8有蛋白質污染；
三、實驗結果和計算
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