需氧或兼性厭氧，有些為厭氧菌。營養要求較高。普通培養基中需加有血液、血清、葡萄糖等才能生長。最適溫度37℃，最適PH7.4～7.6，血瓊脂平板上形成灰白色、有乳光、表面光滑、邊緣整齊、直徑0.5—0.75mm的細小菌落，不同菌株有不同溶血現象。肺炎鏈球菌與甲型溶血性鏈球菌均產生α溶血環。肺炎鏈球菌可產生自溶酶，因此平板培養48小時候，菌體可自溶，菌落中央下陷呈臍狀；若是在液體培養基中培養，液體初期呈渾濁狀態，繼而逐漸變澄清。自溶酶在細菌生長的穩定期可被激活，也可被膽汁或膽鹽激活。
