（1）補體和溶血素的滴定。
①取補體1ml，加BBS 9ml，依次稀釋成1：20，1：30，1：40，1：50，1：60，1：80，1：100，1：200，1：400，同時取50%的溶血素0.2ml，加BBS 9.8ml，即為1：100的溶血素，然后繼續稀釋成1：800，1：1600，1：3200，1：6400。
②采取方陣排列試管，縱行各管加不同濃度的補體0.1ml，橫排各管加溶血素0.1ml（皆應從最高稀釋度加起）混勻后，各管加BBS 0.2ml，補體和溶血素對照管各加BBS0.3ml，最后在各管中加2%羊紅細胞0.1ml。各管總量為0.5ml，搖勻，放37℃水箱中30min，觀察結果。
以完全溶血的補體和溶血素最高稀釋度為各自的單位。溶血素1：3200為一個溶血素單位，補體1：80為一個補體單位。在實際應用時，溶血素用2u（3200÷2=1600），補體用2.5u（80÷2.5=32）。
（2）正式試驗：
①用V型微量反應板操作，每份標本作一個試驗孔，一個血清對照孔。各孔內先加BBS 0.025ml。
②用稀釋棒蘸取血清（0.025ml）加入第一孔，旋轉后移入第二孔，共八孔，如此可得1：2～1：256稀釋。
③加入各試劑：
（3）結果判斷：凡對照組各管的結果應符合以下情況，否則應重做。
補體對照管：2.5u=0，1u=0～±，0.5u=3～4。羊紅細胞對照管：4。抗體對照管：0。陰性對照管；1：2～1：256=0。陽性對照管：同一份陽性血清，每次結果應一致。
當各測定管反應最強一管仍為±報告可疑，1～4報告陽性。如測定管和血清對照管均抗補體，全部測定管皆為0，報告陰性。
檢查抗體的方法與檢查抗原的方法一樣，只是改用4個單位已知抗原，藉以測定被檢血清。