2 . 大豆色拉油DNA提取操作程序
取 20ml 精煉大豆色拉油加入 20ml Buffer Ⅰ，磁力攪拌器充分混勻， 2 小時；
加入 40ml Buffer Ⅱ，磁力攪拌器充分混勻， 2-3 小時；
4 ℃， 12,000rpm 離心 20 分鐘，小心移去油相；
加入等體積 Buffer Ⅲ與 4 μl Buffer Ⅳ，混勻，常溫放置 10 分鐘后， 12,000rpm 離心 20 分鐘，棄上清，保留沉淀；
加入 1 ml Elution Buffer 溶解沉淀，加入 1ml 異丙醇，混勻，常溫放置 10 分鐘后， 12,000rpm 離心 20 分鐘，棄上清，保留沉淀；
在沉淀中加入 100 μl Elution Buffer, 于 37 ℃充分溶解沉淀， 5 分鐘后加 300 μl Buffer Ⅴ，上下顛倒 10 次，充分混勻；
取出離心柱，將離心柱放置在一個 2ml 的套管上，將溶液加入到離心柱中，放置 2 分鐘；
將離心柱和 2ml 套管一起用 8,000rpm 離心 30 秒，棄去 2ml 套管中的溶液，在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅰ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅰ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅱ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅱ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
12,000rpm 離心 30 秒，去除離心柱中痕量殘余溶液；
將離心柱放置在一個新的 1.5ml 離心管中（離心管請自備），在離心柱底部中央小心加入 50 μl Elution Buffer, 于 Buffer ， 37 ℃放置 2 分鐘后， 12,000rpm 離心 30 秒；若需提高得率，可在在離心柱底部中央小心加入 50 μl Elution Buffer, 于 Buffer ， 37 ℃放置 2 分鐘后， 12,000rpm 離心 30 秒；
離心管中的溶液即可作為 PCR 反應的摸板。建議一個 PCR 反應使用 0.5 μl DNA, 其余樣品在 -20 ℃保存備用。
腐乳DNA提取操作程序
取一塊腐乳放在研缽中，加入液氮將樣品研磨成粉末，將磨碎樣品轉入 50ml 的離心管中；
加入 15mlExtraction Buffer Ⅰ，充分混勻；
20 ℃， 12,000rpm 離心 5 分鐘；
去掉上清，加入 10ml Buffer Ⅱ和 4ml Buffer Ⅲ，充分混勻；
65 ℃水浴保溫 15 分鐘
20 ℃， 12,000rpm 離心 10 分鐘，吸取上清到另一新的離心管中；
加入等體積氯仿，輕輕混勻；
20 ℃， 12,000rpm 離心 10 分鐘，吸取上清到另一新的離心管中；
加入等體積異丙醇（自備），混勻；
10) 常溫放置 10 分鐘后， 20 ℃， 12,000rpm 離心 10 分鐘，棄上清，保留沉淀；
11) 在沉淀中加入 100 μl Elution Buffer, 于 37 ℃充分溶解沉淀， 5 分鐘后加 300 μl Buffer Ⅳ，上下顛倒 10 次，充分混勻；
12 ）將離心柱放置在一個 2ml 的套管上，將溶液加入到離心柱中，放置 2 分鐘；
13 ）將離心柱和 2ml 套管一起用 8,000rpm 離心 30 秒，棄去 2ml 套管中的溶液，在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅰ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
14 ）在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅰ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
15 ）在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅱ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
16 ）在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅱ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液； 17 ） 12,000rpm 離心 30 秒，去除離心柱中痕量殘余溶液；
18 ）將離心柱放置在一個新的 1.5ml 離心管中（離心管請自備），在離心柱底部中央小心加入 50 μl Elution Buffer, 于 Buffer ， 37 ℃放置 2 分鐘后， 12,000rpm 離心 30 秒；
19 ）離心管中的溶液即可作為 PCR 反應的摸板。建議一個 PCR 反應使用 0.5 μl DNA, 其余樣品在 -20 ℃保存備用。
醬油DNA提取操作程序
取一塊腐乳加入 63ml Buffer Ⅰ，充分混勻于 250ml 的離心管中；
-20 ℃下靜置 10 分鐘；
4 ℃， 12,000rpm 離心 10 分鐘，；
加入 15ml Buffer Ⅱ，磁力攪拌器充分混勻， 2-3 小時；
吸取溶液與 50ml 的離心管中， 20 ℃， 12,000rpm 離心 10 分鐘，棄上清；
加入 10ml Buffer Ⅲ和 4ml Buffer Ⅳ重新懸浮；
65 ℃水浴保溫 30 分鐘
20 ℃， 12,000rpm 離心 10 分鐘，吸取上清到另一新的離心管中；
加入等體積氯仿，輕輕混勻；
10) 0 ℃， 12,000rpm 離心 10 分鐘，吸取上清到另一新的離心管中；
11) 加入等體積氯仿，輕輕混勻；
12) 常溫放置 10 分鐘后， 20 ℃， 12,000rpm 離心 10 分鐘，棄上清，保留沉淀；
13) 在沉淀中加入 100 μl Elution Buffer, 于 37 ℃充分溶解沉淀， 5 分鐘后加 300 μl Buffer Ⅳ，上下顛倒 10 次，充分混勻；
14) 將離心柱放置在一個 2ml 的套管上，將溶液加入到離心柱中，放置 2 分鐘；
將離心柱和 2ml 套管一起用 8,000rpm 離心 30 秒，棄去 2ml 套管中的溶液，在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅰ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅰ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅱ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅱ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
12,000rpm 離心 30 秒，去除離心柱中痕量殘余溶液；
將離心柱放置在一個新的 1.5ml 離心管中（離心管請自備），在離心柱底部中央小心加入 50 μl Elution Buffer, 于 Buffer ， 37 ℃放置 2 分鐘后， 12,000rpm 離心 30 秒；
離心管中的溶液即可作為 PCR 反應的摸板。建議一個 PCR 反應使用 0.5 μl DNA, 其余樣品在 -20 ℃保存備用。
玉米淀粉DNA提取操作程序
稱取 2g 加入 20ml Buffer Ⅰ，充分混勻；
20 ℃， 12,000rpm 離心 10 分鐘；
加入 10ml Buffer Ⅱ，充分混勻；
20 ℃， 12,000rpm 離心 10 分鐘；
加入 10ml Buffer Ⅲ和 4ml Buffer Ⅳ，充分混勻；
65 ℃水浴保溫 30 分鐘
20 ℃， 12,000rpm 離心 10 分鐘，吸取上清到另一新的離心管中；
加入等體積氯仿，輕輕混勻；
20 ℃， 12,000rpm 離心 10 分鐘，吸取上清到另一新的離心管中；
10) 加入等體積異丙醇，混勻；
11) 常溫放置 10 分鐘后， 20 ℃， 12,000rpm 離心 10 分鐘，棄上清，保留沉淀；
12) 在沉淀中加入 100 μl Elution Buffer, 于 37 ℃充分溶解沉淀， 5 分鐘后加 300 μl Buffer Ⅳ，上下顛倒 10 次，充分混勻；
13) 取出離心柱，將離心柱放置在一個 2ml 的套管上，將溶液加入到離心柱中，放置 2 分鐘；
14) 將離心柱和 2ml 套管一起用 8,000rpm 離心 30 秒，棄去 2ml 套管中的溶液，在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅰ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
15 ）在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅰ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
16 ）在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅱ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
17 ）在離心柱中加入 200 μl Wash Buffer Ⅱ ,8,000rpm 離心 30 秒，棄溶液；
18 ） 12,000rpm 離心 30 秒，去除離心柱中痕量殘余溶液；
19 ）將離心柱放置在一個新的 1.5ml 離心管中（離心管請自備），在離心柱底部中央小心加入 50 μl Elution Buffer, 于 Buffer ， 37 ℃放置 2 分鐘后， 12,000rpm 離心 30 秒；
20 ）離心管中的溶液即可作為 PCR 反應的摸板。建議一個 PCR 反應使用 0.5 μl DNA, 其余樣品在 -20 ℃保存備用。
二． PCR擴增方法
1 35s- EPSES的PCR檢測
1) 反應體系：
Taq 酶 0.5 μl (2unit)
Taq Buffer 10 ＊ 5.0 μl
DNTPs 4.0 μl
引物 -1 2.5 μl
引物 -2 2.55 μl
DNA 1.0 μl
水 33.5 μl
2) 反應程序： 96 ℃ /2 分鐘，（ 96 ℃ /30 秒， 65 ℃ /1 分鐘）× 30 個循環， 72 ℃ /3 分鐘；
3) 凝膠電泳： 2% 瓊脂糖， 100V, 60 分鐘。
2 PSES- Nos的PCR檢測
1 ）反應體系：
Taq 酶 0.5 μl (2unit)
Taq Buffer 10 ＊ 5.0 μl
DNTPs 4.0 μl
引物 -1 5.0 μl
引物 -2 5.0 μl
DNA 1.0 μl
水 29.5 μl
2 ） 反應程序： 94 ℃ /5 分鐘，（ 95 ℃ /1 分鐘， 62 ℃ /30 秒 ,72 ℃ /30 秒） 40 個循環， 72 ℃ /3 分鐘；
3 ）凝膠電泳： 2% 瓊脂糖， 100V, 60 分鐘。
3 Lectin引物反應條件：
1 ）反應體系：
Taq 酶 0.5 μl (2unit)
Taq Buffer 10 ＊ 5.0 μl
DNTPs 4.0 μl
引物 -1 5.0 μl
引物 -2 5.0 μl
DNA 1.0 μl
水 29.5 μl
2 ） 反應程序： 96 ℃ /2 分鐘，（ 94 ℃ /30 秒， 62 ℃ /30 秒 ,72 ℃ /30 秒） 40 個循環， 72 ℃ /3 分鐘；
3 ）凝膠電泳： 2% 瓊脂膠， 100V, 60 分鐘。