溶血空斑實驗原理是將綿羊紅細胞免疫的家兔或小鼠,取家兔淋巴結或小鼠脾細胞制成細胞懸液,與高濃度綿羊紅細胞混合后加入瓊脂糖凝膠中,其中每個釋放溶血性抗體的B淋巴細胞在補體的參與下可溶解周圍的綿羊紅細胞,在周圍形成一個可見的空斑,一個空斑代表一個抗體形成細胞,空斑的數量反映機體的體液免疫功能。