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  • 發布時間:2008-10-29 19:14 原文鏈接: 煙草過氧化物酶Ⅰ的分離純化及部分光譜特性研究

    摘要:煙草過氧化物酶同工酶Ⅰ(TOP Ⅰ) 的分離純化過程,主要包括勻漿、超聲破碎、
    過濾、(NH4) 2SO4 分級沉淀、DE252 纖維素陰離子交換層析、Sephadex G275 凝膠層析、DEAE2Sephadex A250 陰離子交換層析. 經純化的TOP Ⅰ,純化酶的比活力為4 826 U/mg ,在SDS2PAGE 上顯示出一條蛋白帶,分子量在21 000 左右,基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(MALDI $ TOF2MS) 測得TOP Ⅰ分子量為21 888. 5 ,等電點pI 為3. 5 ;光譜學分析揭示,在402 nm 處有一典型的Soret 帶,在498 nm 和636 nm 處有特征吸收峰,表明TOP Ⅰ為一含血紅素的酸性蛋白酶. 酸度對TOPI 的在紫外可見區的特征吸收峰及熒光光譜均產生一定的影響,反映了TOP Ⅰ分子獨特的光譜學特性.
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