• <table id="ceegc"></table>
  • <td id="ceegc"><option id="ceegc"></option></td>
  • <optgroup id="ceegc"></optgroup>
  • <td id="ceegc"></td>
  • <table id="ceegc"></table>
  • 發布時間:2019-07-27 09:49 原文鏈接: 玉米赤霉烯酮免疫親和柱操作說明

    【概要】

    玉米赤霉烯酮(Zearaleaone)又稱F-2毒素,是玉米赤霉菌的代謝產物,具有類雌激素樣作用,具有較強的生殖毒性和致畸作用,可引起動物發生雌激素亢進癥,導致動物不孕或流產,對家禽、豬、牛和羊的影響較大,給畜牧業帶來很大的經濟損失。


    【適用范圍及性能】

    用于定性、定量檢測谷物、酒類等食品和飼料等樣本中的玉米赤霉烯酮時的樣品前處理。

    柱容量:≥200ng

    回收率:≥90%


    【試驗原理】

    本產品的測定的基礎是抗原抗體反應,玉米赤霉烯酮單克隆抗體連接在柱內凝膠上,樣品中的玉米赤霉烯酮經過提取、過濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢的通過玉米赤霉烯酮免疫親和層析柱,在免疫親和柱內,玉米赤霉烯酮與抗體結合,之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結合的其他物質。用甲醇洗脫玉米赤霉烯酮,然后注入到分析儀器中用于檢測。


    【包裝組成】

    根據不同規格,每一個盒中包含5-25支玉米赤霉烯酮免疫親和層析柱及1份說明書。


    【需要而未提供的設備及試劑】

    設備:

    ┅┅高速均質器或組織勻漿機

    ┅┅粉碎機

    ┅┅200ml/50ml量筒

    ┅┅天平:感量0.1g

    ┅┅微量移液器:單道 100?l~1000?l

    ┅┅槽紋濾紙(折疊快速定性或定量濾紙)

    ┅┅玻璃微纖維濾紙(1.5?m孔徑)

    ┅┅50ml漏斗

    ┅┅一次性玻璃試管

    ┅┅泵流操作架(包括空氣泵,不同容積的玻璃注射器等)

    試劑:

    ┅┅甲醇(色譜級)

    ┅┅蒸餾水或去離子水

    ┅┅pH7.0磷酸鹽緩沖溶液(PBS緩沖液):稱取8.0g氯化鈉,1.2g磷酸氫二鈉,0.2g磷酸二氫鉀,0.2g氯化鉀,用990mL純水溶解,然后用濃鹽酸調節pH值至7.0,最后用純水稀釋至1000mL


    【試劑配制】

    樣品提取液:配制甲醇-水(8:2)溶液作為樣品提取液


    【樣本處理步驟】

    (一)花生,玉米,大米,小麥及其制品和飼料

    ┅┅稱取50g粉碎的樣品于100mL容量瓶中,加入5.0g氯化鈉,以樣品提取液定容。

    ┅┅轉移至均質杯中,在均質器上高速攪拌,提取2分鐘;

    ┅┅4000r/min離心5min或用定量濾紙過濾

    ┅┅取10mL濾液并加入40mLPBS緩沖液稀釋,用玻璃微纖維濾紙過濾,取過濾后液體待測;

    ┅┅將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器;

    ┅┅將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約1滴/S的流速緩慢通過免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過柱體;

    ┅┅以10.0mL的PBS溶液和去離子水依次淋洗柱子1次,流速約為1滴-2滴/S,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過柱體;

    ┅┅準確加入1.0mL色譜級甲醇洗脫,流速為1 滴/S,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。


    (二)啤酒,黃酒等酒類

    ┅┅取10mL試樣脫氣后與90mLPBS緩沖液混勻,用玻璃微纖維濾紙過濾,取過濾后液體待測;

    ┅┅將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器;

    ┅┅將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調節壓力使溶液以約1滴/S的流速緩慢通過免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過柱體;

    ┅┅以10.0mL的PBS溶液和去離子水依次淋洗柱子1次,流速約為1滴-2滴/S,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過柱體;

    ┅┅準確加入1.0mL色譜級甲醇洗脫,流速為1 滴/S,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。


    【結果判定】

    經免疫親和柱凈化后,收集到的甲醇洗脫液可直接使用熒光計或者HPLC檢測,也可使用薄層色譜或者酶聯免疫試劑盒進行檢測。收集到的1ml洗脫液中的玉米赤霉烯酮含量相當于1g樣品中玉米赤霉烯酮含量。


    【注意事項】

    ┅┅玉米赤霉烯酮危害很大,應戴手套操作。

    ┅┅不要使用過了有效日期的免疫親和柱。


    【貯藏條件及保存期】

    貯藏條件:親和柱可于常溫保存,2-8℃儲存可延長有效期,不可凍存

    保存期:該產品有效期為12個月。


  • <table id="ceegc"></table>
  • <td id="ceegc"><option id="ceegc"></option></td>
  • <optgroup id="ceegc"></optgroup>
  • <td id="ceegc"></td>
  • <table id="ceegc"></table>
  • www.mitao95.com