用酸水解法怎么測定脂肪

一、目的
脂肪廣泛存在于許多植物的種子和果實中，測定脂肪的含量，可以作為鑒別其品質優劣的一個指標。脂肪含量的測定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、電測和核磁共振法等。目前國內外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（Soxhlet extractor method）是公認的經典方法，也是我國糧油分折首選的標準方法。通過本實驗的學習,掌握索氏抽提法測定粗脂肪含量的原理和操作方法。
二、原 理
本實驗采用索氏抽提法中的殘余法，即用低沸點有機溶劑（乙醚或石油醚）回流抽提，除去樣品中的粗脂肪，以樣品與殘渣重量之差，計算粗脂肪含量。由于有機溶劑的抽提物中除脂肪外，還或多或少含有游離脂肪酸、甾醇、磷脂、蠟及色素等類脂物質，因而抽提法測定的結果只能是粗脂肪。
三、實驗材料、主要儀器和試劑

式中：a：稱量瓶加濾紙包重（g）
b：稱量瓶加濾紙包和烘干樣重（g）
c：稱量瓶加濾紙包和抽提后烘干殘渣重（g）
六、附 注
（1）測定用樣品、抽提器、抽提用有機溶劑都需要進行脫水處理。這是因為：第一，抽提體系中有水，會使樣品中的水溶性物質溶出，導致測定結果偏高；第二，抽提體系中有水，則抽提溶劑易被水飽和（尤其是乙醚，可飽和約2％的水），從而影響抽提效率；第三，樣品中有水，抽提溶劑不易滲入細胞組織內部，結果不易將脂肪抽提干凈。
（2）試樣粗細度要適宜。試樣粉末過粗，脂肪不易抽提干凈；試樣粉末過細，則有可能透過濾紙孔隙隨回流溶劑流失，影響測定結果。
（3）索氏抽提法測定脂肪最大的不足是耗時過長，如能將樣品先回流1～2 次，然后浸泡在溶劑中過夜，次日再繼續抽提，則可明顯縮短抽提時間。
（4）YG-Ⅱ型油分測定器容量大，適合于樣品較多的選種鑒定工作使用，溫度控制在70℃左右，8h 可提取完畢。
（5）必須十分注意乙醚的安全使用。抽提室內嚴禁有明火存在或用明火加熱。乙醚中不得含有過氧化物，保持抽提室內良好通風，以防燃爆。乙醚中過氧化物的檢查方法是：取適量乙醚，加入碘化鉀溶液，用力搖動，放置1min，若出現黃色則表明存在過氧化物，應進行處理后方可使用。處理的方法是：將乙醚放入分液漏斗，先以1/5 乙醚量的稀KOH溶液洗滌2～3 次，以除去乙醇；然后用鹽酸酸化，加入1/5 乙醚量的FeSO4 或Na2SO3 溶液，振搖，靜置，分層后棄去下層水溶液，以除去過氧化物；最后用水洗至中性，用無水CaCl2 或無水Na2SO4 脫水，并進行重蒸餾。