干熱滅菌箱采用干熱滅菌法，是指用高溫干熱空氣滅菌的方法。該法適用于耐高溫的玻璃和金屬制品以及不允許濕熱氣體穿透的油脂（如油性軟膏機制、注射用油等）和耐高溫的粉末化學藥品的滅菌，適用于耐高溫的玻璃器皿、瓷器、玻質注射器等，不適合橡膠、塑料及大部分藥品的滅菌。
在干熱狀態下，由于熱穿透力較差，微生物的耐熱性較強，必須長時間受高溫的作用才能達到滅菌的目的。因此，干熱空氣滅菌法采用的溫度一般比濕熱滅菌法高。為了保證滅菌效果，一般規定：135-140攝氏度滅菌3-5h；160-170攝氏度滅菌2-4h；180-200攝氏度滅菌0.5-1h，可殺滅包括芽胞在內的所有微生物。