紫外分光光度法測定飼料中的鐵
飼料中鐵的測定，目前多采用國標法即原子吸收光度法(ＡＡＳ)。由于儀器價格昂貴，很多飼料生產企業無力購置，而常規方法又因嚴重的干擾問題使得測定難以進行。本文向讀者推薦一種紫外分光光度法測定飼料中的鐵的方法，運用本方法使用國產７２１型或７５１型分光光度計就可測定飼料原料、成品料以及預混劑中鐵的含量，簡單可靠，不失為飼料生產企業控制產品質量的好方法。 １ 試驗材料與方法 １.１ 試驗儀器與試劑 紫外分光光度計；電子天平(ＤＴｌ００型)；馬弗爐；電爐；１ｃｍ石英比色杯。 鹽酸(ｄ＝１.１９，優級純)；去離子水。 １０％鹽酸羥胺溶液：將１０ｇ鹽酸羥胺溶于１００ｍｌ水中。 ０.１％鄰菲羅啉顯色劑：將０.１ ｇ鄰菲羅啉溶于１００ｍ１水中。 １０％乙酸鈉溶液：將１０ｇ乙酸鈉溶于１００ｍｌ水中。 鐵標準溶液：將０.１０００ｇ純鐵絲溶于１∶１鹽酸中，用水稀釋至１ｌ，此溶液含鐵１００ｍｇ／ｌ。 １.２ 試驗方法 １.２.１ 樣品的預處理 飼料樣品預處理：稱取３－５ｇ飼料樣品(精確至０.０００１)于瓷質坩堝中，于電爐上炭化后置于馬弗爐中在５００℃下灰化３－４ｈ，灰化完全后取出。稍涼，加少量水潤濕，加２０ｍｌ １∶１鹽酸溶液，移入１００ｍｌ容量瓶中，用水定容、過濾。 預混劑的預處理：稱取１－２ｇ預混劑(精確到０.０００１)于２００ｍｌ，燒杯中，加入１∶１鹽酸１０ｍｌ溶解，移入１００ｍｌ容量瓶中，用水沖洗燒杯３－４次，并入容量瓶中，定容后過濾。 １.２.２ 標準曲線的繪制取６個５０ｍｌ容量瓶，分別加入０，０.５，１.０，１.５，２.０，２.５ｍｌ鐵標準溶液，加少量水至２０ｍＬ，然后依次加入１ｍｌ１０％鹽酸羥胺溶液，８ｍＬ １０％乙酸鈉溶液， １０ｍｌ ０.１％鄰菲羅啉顯色劑(每一步聚均需搖勻)，用水定容至刻度，此溶液分別含鐵０，１，２，３，４，５ｍｇ／ｌ。靜置２ｈ后于５３０ｎｍ，用１ｃｍ比色皿進行測定，并以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標繪制標準曲線(見圖１)。 １.２.３ 樣品的測定 準確移取上述待測溶液１～５ｍｌ于５０ｍｌ容量瓶中，加入少量水至２０ｍｌ，然后依次加入１０％鹽酸羥胺溶液１ｍｌ，１０％乙酸鈉溶液８ｍｌ，０.１％鄰菲羅啉顯色劑１０ｍｌ，用水定容，搖勻。靜置２ｈ后以空白為參比進行測定，計算公式為： Ｆｅ的含量；Ｃ×Ｖ０×Ｖ２／Ｍ×Ｖ１ 其中：Ｃ——標準曲線中查得樣品吸光度值所對應的濃度值(ｍｇ／ｌ)； Ｖ１——吸取供測樣品的體積(ｍｌ)； Ｖ２——測定用樣品的體積(ｍｌ)； Ｖ０——供測試樣品溶液的體積(ｍｌ)； Ｍ——樣品質量(ｇ)。 ２討論與分析 ２.１ 不同樣品預處理的方法 對飼料原料、成品料及預混合劑可采用上述方法處理；對含肉粉等脂肪量較高的樣品，應采用干濕法結合的方法，以避免待測元素損失，但最好不使用磷酸，因磷酸將嚴重干擾測定，消解應控制在２５０℃左右進行低溫消解。 ２.２ 測定時間的確定 試驗表明，絡合反應瞬間即可完成，但絡合生成物需２ｈ才能穩定，因此應靜置２ｈ后進行測定。 ２.３ 干擾測定的因素 首先，應注意顯色時所加溶液的順序不能改變，必須先加還原劑再加緩沖溶液，最后加顯色劑；其次，由于高氯酸對顯色劑有干擾，故不能采用ＨＮ０３－ＨＣＬＯ４體系消化樣品溶液，可采用ＨＮ０３－ＨＣｌ體系；同時要注意樣品與標準溶液的酸度應保持一致。 ２.４ 回收試驗情況和回收率 平均回收率為１００.１４％。 |