發熱待診患者診斷,臨床常需要實驗室進行傷寒相關實驗診斷,請問目前是否有較敏感、特異的方法可取代肥達氏試驗?
山東大學齊魯醫院檢驗科王傳新主任(中華醫學會檢驗分會免疫學組副組長):傷寒相關實驗檢測傳統方法為細菌培養和肥達試驗。細菌培養特異性高,是確診傷寒的金標準,但結果易受抗生素、培養條件、標本采集的質、量和時間等多因素影響,敏感性低且費時;肥達試驗是用傷寒桿菌的菌體(O)抗原和鞭毛(H)抗原以及副傷寒甲、乙、丙菌液與稀釋的待測血清反應,根據凝集效價判斷血清中有無傷寒桿菌的抗體,由于傷寒桿菌的O抗原與A群、B群沙門氏菌有部分相同抗原,與甲、乙兩種副傷寒桿菌有一定的交叉反應,肥達反應診斷傷寒桿菌特異性差,敏感性低,常出現假陽性,而且抗原抗體結合出現凝集沉淀常需要時間較長;大孔反應板凝集試驗原理與肥達反應相同,結果觀察更為清晰。目前其他免疫學檢測方法有金標法、ELISA法和PCR技術等,金標法、ELISA法具有較高的特異性和敏感性,操作簡單、快速,陽性反應表明有傷寒桿菌或傷寒抗原存在的可能,但存在一定的局限性。PCR檢測,高特異,受試劑、操作等因素影響,陰性不能排除傷寒可能。
濟南軍區總醫院檢驗科胡成進主任(中華醫學會檢驗分會免疫組
委員):傷寒的實驗室診斷最經典的方法是肥達反應,已有100多年歷史, 始終伴隨著爭議。以往由于條件所限,肥達反應是疑似病例診斷為傷寒的唯一的實驗室手段。但肥達反應存在諸多問題,在診斷上不敏感不特異,已表現出顯著的局限性,需要改用其他檢測方法以克服肥達反應在檢測特異性和靈敏度、以及檢測時限上存在的問題。比如ELISA方法可以代替肥達反應來監測血清中抗原或抗體,是一種相對既靈敏又特異的診斷方法;還有其他一些商品化的IgM抗體檢測試劑盒,包括Tubex test、Typhidot/Typhidot-M、IgM Dipstick等,其敏感性和特異性均優于肥達反應。但血清學方法存在共同的缺點,即存在明顯的交叉反應,原因與沙門菌屬基因組90%以上為共有,擁有很多共同抗原有關。因此,在現場條件不容許使用培養或肥達反應的地方,一些簡單的血清學方法可能有用武之地,只是方法特異性低的問題還需要進一步解決。
分離培養法是最基本也是診斷傷寒病例的金標準。培養所用的標本可有骨髓、血液、糞便和尿液。由于培養方法受標本采集時機和抗生素應用的影響,陽性率會大大降低,而且培養所需時間較長,因此該方法存在明顯不足,但可為預防控制,預測傷寒的流行趨勢,菌株的進化關系等提供基礎資料。
PCR檢測標本中的傷寒沙門菌核酸,是目前公認最為敏感和特異的診斷方法。但PCR方法容易受污染影響,另外,傷寒和甲型副傷寒沙門菌是胞內寄生菌,抗生素的濫用加劇了血液中細菌數量的減少,制備DNA模板過程中樣品的損失增加PCR擴增的難度,其特異性和敏感性目前仍存有爭議。
淮安市第一人民醫院檢驗科姜玉章主任(江蘇省醫學會第六屆微生物與免疫學分會委員):敏感性和特異性通常是一對矛盾,且快速、敏感性高且特異性好的檢測方法是臨床和檢驗人員追求的共同目標。對發熱待診患者進行傷寒相關實驗診斷較敏感、特異的方法,除肥達氏外,有:1、沙門氏菌測試片;2、骨髓培養法;3、沙門氏顯色培養基法。