由于食品的種類不同，其中脂肪含量及其存在形式也不相同，測定脂肪的方法也就不同。
常用的測定方法有：
（1）索式提取法 （2）巴布科克法 （3）益勒式法 （4）羅斯-哥特里法（5）酸分解法
過去測定脂肪普遍采用的是索式提取法，這種方法至今仍被認為是測定多種食品脂類含量的代表性的方法，但對于某些樣品測定結果往往偏低，而巴布科克法、益勒式法、羅斯-哥特里法主要用于乳、及乳制品中脂類的測定，而酸水解法測出的脂肪為游離態脂和結合脂全部脂類。
一、 索式提取法（經典方法）
1、 原理
樣品經前處理后，放入圓筒濾紙內，將濾紙筒置于索式提取管中，利用乙醚或石油醚在水浴中加熱回流，使樣品中的脂肪進入溶劑中，回收溶劑后所得到的殘留物，即為脂肪（粗脂肪）
采用這種方法測出游離態脂，此外還含有磷脂、色素、蠟狀物、揮發油、糖脂等物質，所以用索氏提取法測得的脂肪為粗脂肪。
2、 適用范圍與特點
索氏提取法適用于脂類含量較高，結合態的脂類含量較少，能烘干磨細，不宜吸濕結塊的樣品的測定。
此法只能測定游離態脂肪，而結合態脂肪無法測出，要想測出結合態脂肪需在一定條件下水解后變成為游離態的脂肪方能測出。
另外此法是經典方法，對大多數樣品結果比較可靠，但需要周期長，溶劑量大。
3、 方法
（1） 濾紙筒的制備
將濾紙剪成長方形8×15cm ，卷成圓筒，直徑為6cm，將圓筒底部封好，最好放一些脫脂棉，避免向外漏樣。
（2） 稱取樣品，將樣品烘干磨細，稱取一定量與紙筒封好上口，最好用測定水的樣品。
（3） 索式抽提器的準備
索氏抽提器由三部分組成，回流冷凝管、提取管、提脂瓶組成。提脂瓶在使用前需烘干并稱至恒重。其它要干燥。
（4） 抽提
將裝好樣的紙筒放入抽提管 ， 倒入乙醚，乙醚的量從提取管加入，加入的量為提取瓶體積的2/3 接上冷凝裝置，在恒溫水浴中抽提，水浴溫度大約為55℃左右，可用濾紙檢驗，理論值抽提6-8小時，實際值3-4小時，但也根據樣品性質來決定。
（5） 回收乙醚
當乙醚在提取管內即將虹吸時立即取下提取管，將其下口放到乙醚回收瓶內，使之傾斜，然后將提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恒重。
（6） 計算
脂肪%= (W2-W1)/W x 100
W2——瓶和樣品重（g）W1——瓶子重量（g） W——樣品重量（g）
或：
脂肪%=（抽提后濾紙與樣品重量—抽提前濾紙重量）/樣品重量 × 100
濾紙筒應事先放入燒杯與100-105℃烘箱烘至恒重。
3、注意事項：
（1）樣品應干燥后研細，裝樣品的濾紙筒一定要緊密，不能往外漏樣品，否則重做。
（2）放入濾紙筒的高度不能超過回流彎管，否則乙醚不易穿透樣品，使脂肪不能全部提出，造成誤差。
（3） 碰到含多糖及糊精的樣品要先以冷水處理，等其干燥后連同濾紙一起放入提取器內。
（4） 提取時水浴溫度不能過高，一般使乙醚剛開始沸騰即可（約45℃左右），回流速度以8-12次/時為宜。
（5） 所用乙醚必需是無水乙醚，如含有水分則可能將樣品中的糖以及無機物抽出，造成誤差。
（6） 若用干樣品測定脂肪，可按下式計算原來樣品脂肪的含量
脂肪（%）= （W1-W2）(100-A) / W
A— 100克樣品中水分的含量（g）
(7) 冷凝管上端最好連接一個氯化鈣干燥管，這樣不僅可以防止空氣中水分進入，而且還可以避免乙醚揮發在空氣中。這樣可防止實驗室微小環境空氣的污染，如無此裝置，塞一團干脫脂棉球亦可。
（8）如果沒有無水乙醚可以自己制備，制備方法如下：在100ml乙醚中，加入無水石膏50克，振搖數次，靜止10小時以上，蒸餾，收集35℃以下的蒸餾液，即可應用。
（9）將提取瓶放在烘箱內干燥時，瓶口向一側傾斜45度防止揮發物乙醚易與空氣形成對流，這樣干燥迅速。
（10）如果沒有乙醚或無水乙醇時，可以用石油醚提取，石油醚沸點30-60℃為好。
（11）使用揮發乙醚或石油醚時，切忌直接用火源加熱，應用電熱套、電水浴、電燈泡等。
（12） 這里恒重的概念有區別，它表示最初達到的最低重量，即溶劑和水分完全揮發時的恒重，此后若在繼續加熱，則因油脂氧化等原因會導致重量增加。
（13） 在干燥器中的冷卻時間一般要一致。
二、 巴布科克法（Babcock 法）
巴布科克法是用來測定乳及乳制品的一種方法，測定牛奶前我們首先搞清牛奶的營養成分。