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  • 發布時間:2020-08-18 09:33 原文鏈接: 菌脂多糖的制備

    實驗方法原理 原理是將細菌懸液加于熱酸——水混合液中,冷卻,離心混合液可分為水溶液層,內含水溶性脂多糖及核酸等及酸層、內含蛋白質。近年來發現在酸層中也含糖類。經離心后沉淀含細胞殘體。

    實驗材料 細菌濃懸液

    試劑、試劑盒 熱酚鹽水

    儀器、耗材 離心機培養箱透析膜

    實驗步驟

    1.   細菌濃懸液用鹽水經2500轉/分,20分鐘離心洗滌一次。


    2.   將沉淀的菌混勻于蒸餾水中,放66℃水浴,然后滴加等量的90%熱酚溶液(預熱至66℃),邊加邊搖,而后在66℃水浴中攪拌25分鐘


    3.   在水浴中冷卻,于4℃冰箱過夜


    4.   以2000轉/分離心15分鐘


    5.   將上層水溶液吸到另一試管中


    6.   剩下的酚層及殘渣組分可再加上述同量水在熱水浴中攪拌30分鐘,冷卻,離心,取上層水溶液。將兩次提的水溶液混合,置透析袋中于生理鹽水中透析2天,其間換幾次鹽水,以除去酚。


    7.   透析后的水溶液層經濃縮(如用聚乙二醇在透析袋外層涂抹以除去水分)。即成粗制脂多糖,于冰箱內保存備用。


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