(一)檢測原理
血細胞比容(Hct、Ht、HCT或PCV)是指在一定條件下,經離心沉淀壓緊的紅細胞在全血樣本中所占比值。
1、離心法:包括溫氏法(Wintrobe法)、微量法:是將抗凝血置于孔徑統一的溫氏管或毛細玻管中,以一定轉速離心一定時間后,計算紅細胞層占全血的體積比。
2、血液分析儀法:原理是當細胞通過計數小孔時,形成相應大小的脈沖,脈沖的多少即為細胞數量,脈沖高度為細胞體積,通過紅細胞平均體積(MCV)和紅細胞計數(RBC)即求得血細胞比容,Hct=MCV×RBC.
(二)方法學評價
1、手工法:有折射計法、粘度法、比密測定法、離心法和放射性核素法。溫氏法:采用中速離心,不能完全排除紅細胞間殘留血漿,測定結果偏高,已屬淘汰。微量法:采用高速離心,細胞間殘留血漿比溫氏法少(約2%),且樣本用量小、操作簡便、殘留血漿1%~3%.
2、血液分析儀法:儀器法CV為1%,手工法CV為2%,儀器法應注意紅細胞增多癥或血漿滲透壓異常時會出現誤差。
(三)質量控制
1、手工法:抗凝劑量不準確、混勻不充分、離心速度不夠會產生誤差。紅細胞形態異常(如小紅細胞、大紅細胞、橢圓形紅細胞、鐮形紅細胞)或紅細胞增多癥可使血漿殘留量增加6%.當紅細胞增多時,Hct明顯增高,血漿殘留也會增加。
2、血液分析儀法:要注意Hct是否與RBC、MCV相關。
(四)參考值
Wintrobe法:男性0.40~0.54;女性0.37~0.47.
微量法:男性0.47±0.04;女性0.42±0.05.
(五)臨床意義
1、增高:見于各種原因所致血液濃縮,如大量嘔吐、大手術后、腹瀉、失血、大面積燒傷、真性紅細胞增多癥(可達0.80L/L)、繼發性紅細胞增多癥等。
2、減低:見于各種貧血,但不同類型的貧血,Hct減少程度與RBC計數值不完全一致。
3、輸液評估:用于評估血漿容量有無增減或濃縮稀釋程度,有助于控制補液量和了解體液平衡情況,是臨床輸血、輸液治療療效觀察的指標。
4、計算平均值:作為紅細胞平均體積、紅細胞平均血紅蛋白濃度計算的基礎數據。也是影響全血粘度的決定因素之一。
(六)操作方法和注意事項
1、溫氏法:取EDTA-K2或肝素鈉抗凝靜脈血2ml,加入溫氏管中,用水平離心機以2264g(即有效半徑22.5cm,3000r/min),離心30分鐘,離心后血液分為5層,自上而下分別為血漿層、血小板層、白細胞層和有核紅細胞層、還原紅細胞層(紫黑紅色)、帶氧紅細胞層(鮮紅色)。讀取還原紅細胞層柱高的毫米數,乘以0.01,即為每升血液中紅細胞體積的升數。
2、微量法:取抗凝全血或末梢血,充入一次性毛細玻管(管長75mm,內徑約0.8~1.0mm,壁厚0.20~0.25mm,每支含肝素2U)的2/3(50mm)處,封口后,用水平式毛細管Hct離心機以12000r/min(相對離心力RCF≥10000g),離心5min,用專用讀數板或刻度尺,讀取還原紅細胞層和全層長度,計算Hct值。
3、注意事項:橡皮泥封管口底面應平整,以深入毛細血管內2mm左右為宜。應做雙份試驗,結果之差應<0.01
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