| 實驗步驟 | 一、材料準備
1. DAB-H2O2配制：以0.05 mol/l Tris-HCl（pH7.6）溶解3,3-二氨基聯苯胺50 mg，使DAN終濃度為0.05%，過濾。顯色時加入30%H2O2適量，使其終濃度為0.01%。
二、實驗步驟
1. 石蠟切片或冰凍切片均可。
2. 石蠟切片常規脫蠟，冰凍切片可用丙酮固定10 min左右，0.01 mol/l PBS（pH7.2~7.6）洗滌5 min，更換三次洗滌液。
3. 加入兔抗GST-π，室溫孵育15 min，PBS洗5 min，洗滌3次，再加入生物素標記的二抗孵育15 min，PBS洗滌5 min，洗3次。
4. 用DAB-H2O2溶液顯色，蘇木素復染，常規酒精脫水，二甲苯透明后封片。陰性對照用PBS代替抗GST-π抗體。 展開 |
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