• <table id="ceegc"></table>
  • <td id="ceegc"><option id="ceegc"></option></td>
  • <optgroup id="ceegc"></optgroup>
  • <td id="ceegc"></td>
  • <table id="ceegc"></table>
  • 發布時間:2020-06-02 19:40 原文鏈接: LB培養基的配制實驗步驟

    實驗步驟

    1. LB 培養基

    Tryptone

    10 g

    Yeast Extract

    5 g

    NaCl

    10 g

    加水至 1000 mL(pH 7.2,固體培養基加 1.8% 瓊脂粉)。

    2. LB 抗性篩選培養基

    待滅菌后的 LB 固體培養基溫度降至 50℃左右,加入抗生素儲存液至終濃度 50 μg/mL,即每毫升培養基加抗生素儲存液 1 μL,搖勻后,倒平板。

    液體 LB 抗性篩選培養基,在完全冷卻后加入抗生素,加入的量與固體培養基相同。

    3. LB/Amp/IPTG/X-gal 培養基

    在含 100 μg/mL Amp 的 LB 瓊脂平板上加入 40 μL X-gal 貯存液和 40 μL IPTG 溶液,用無菌玻璃涂布器把溶液均勻涂布于整個平板表面,超凈工作臺上吹干后備用。

    4. SOC 液體培養基

    Tryptone

    20 g

    Yeast Extract

    5 g

    NaCl

    0.5 g

    加入 950 mL 水,完全溶解后加入 250 mmol/L 的 KCl 溶液 10 mL,用NaOH 溶液(5 mmol/L)調節 pH 值至 7.0,雙蒸水定容至 1000 mL 后高壓滅菌。滅菌后降溫至 60℃以下,加入 7.2 mL 50% 葡萄糖溶液。使用前加入5 mL 經滅菌的 2 mol/L 的 MgCl2 溶液。


  • <table id="ceegc"></table>
  • <td id="ceegc"><option id="ceegc"></option></td>
  • <optgroup id="ceegc"></optgroup>
  • <td id="ceegc"></td>
  • <table id="ceegc"></table>
  • www.mitao95.com