LB培養基的配制

實驗概要

    了解培養基的配制方法。

實驗步驟

1. LB 培養基

加水至 1000 mL（pH 7.2，固體培養基加 1.8% 瓊脂粉）。

2. LB 抗性篩選培養基

待滅菌后的 LB 固體培養基溫度降至 50℃左右，加入抗生素儲存液至終濃度 50 μg/mL，即每毫升培養基加抗生素儲存液 1 μL，搖勻后，倒平板。

液體 LB 抗性篩選培養基，在完全冷卻后加入抗生素，加入的量與固體培養基相同。

3. LB/Amp/IPTG/X-gal 培養基

在含 100 μg/mL Amp 的 LB 瓊脂平板上加入 40 μL X-gal 貯存液和 40 μL IPTG 溶液，用無菌玻璃涂布器把溶液均勻涂布于整個平板表面，超凈工作臺上吹干后備用。

4. SOC 液體培養基

加入  950 mL 水，完全溶解后加入 250 mmol/L 的 KCl 溶液 10 mL，用NaOH 溶液（5 mmol/L）調節 pH 值至  7.0，雙蒸水定容至 1000 mL 后高壓滅菌。滅菌后降溫至 60℃以下，加入 7.2 mL 50% 葡萄糖溶液。使用前加入5 mL 經滅菌的  2 mol/L 的 MgCl₂ 溶液。