第七節 PCR儀器的發展
PCR溫度循環至關重要,PCR擴增儀各參數必須準確。自Perkin ?Elmer Cetus公司第一臺PCR擴增儀問世以來,現已有幾十家不同的廠家在國內外生產和銷售PCR擴增儀。在短短的幾年間,擴增儀經過幾代的發展,不斷采用新技術,并且進一步朝方便、實用、高智能化和自動化的方向發展。
為了便于了解和選購適宜的PCR實驗設備,現將部分國內外PCR擴增儀列表如下(表22-5);這些儀器主要用變溫鋁塊、變溫水浴及變溫氣流的方式達到熱循環的目的,各有其優缺點。國產1109型DNA擴增儀則是用恒溫浴機械手移位式。更接近于手工操作。PTC-51A/B體積小,智能化與自動化程序高,可以兼做套式PCR,方便實用。以上各種儀器一般都配有微電腦自動控制溫度、時間及循環數,可以達到節 省勞動力的目的。在采用這些儀器作PCR試驗之前,一般均應實測管內溫度變化循環情況,以了解升、降溫時管內因熱傳導造成的溫度滯后情況和實際到達的最高、最低溫度,用于修正設計的循環參數。溫度滯后受到所用Eppendorf管材料、壁厚及形狀(與鋁塊孔匹配程度)的影響,這對變溫鋁塊式儀器影響更大些。對于配用制冷機式半導體元件致冷的儀器,在使用低于室溫的溫度來保冷PCR反應后小管時,應注意冷凝水的問題,勿使流入儀器內浸濕半導體元件而損壞儀器。
表22-5 國內外生產的幾種DNA擴增儀
儀器型號 生產廠家 型式 特點 管數 報價 1109型 北京新技術所與軍科院聯合 機械臂
變溫水浴 電子調溫 40×0.5ml 16400元/臺 90A/B型 中科院遺傳所 機械臂
變溫水浴 電熱 14000元/臺 PTC-51A/B型 軍事醫學科學院 變溫氣流 電子調兼作套式 30×0.5ml 12000元/臺 DNA Thermal Cycler Perkin ?ElmerCetus(美) 變溫鋁塊 壓縮機致冷 48×0.5ml US $ 20000.- Thermocycler
#60
#00
#180 B..Braun
Biotech
(德) 變溫水浴98℃四檔 電熱,自來水冷卻 60×1.5ml
100×1.5ml
180×1.5ml DM 30000.- Automatic temperature Cy-cler Single Block Twin Block Ericomp Inc.(美) 變溫鋁塊25~100℃ 電熱,自來水冷卻 29×1.5ml
58×1.5ml US $4985.-
US $7980.- Grant Autogen Grant Instrumant Ltd(美) 變溫水浴0~99℃ 電熱,自來水冷卻或加冷循環器 50×1.5ml
or
50×1.5ml
US $250. ?plus
US $ 15.-for
Rack(x2) Techne PHC-1
PHC-2 Techne Ltd.(英) 變溫鋁塊0~99℃三檔 電熱500W水冷100W 54×0.5ml
54×0.5ml
24×1.5ml £3383. ?
£3997. - BioOven BioThrm Corp(美) 變溫氣流
-150℃ 115V 11A 200’s of 4×96plate US $ 2990. - Trio-Thermo-block TB-1 Biomertra(德) 半導體變溫 220V 3×20管
分別控溫 DM12900. - Micro cycler E Eppendorf(美) 變溫鋁塊 220V/100V 3×29管 US $ 3500. -