培養基上清直接電泳跑出來的條帶經常很難看，可以TCA沉淀濃縮后跑電泳，一般表達量大于1mg/ml可以看到明顯條帶，這是我用的TCA沉淀方法，效果很好：
1.菌液10000g,離心5分鐘，收集表達上清。
2.取500-1000ul上清于EP管中，加入1/9體積的100％TCA，顛倒10次混勻。
3.樣品置于冰浴中大于0.5小時，過夜效果更好。
4.15000g,離心10－20分鐘,可見有棕黑色沉淀，倒掉上清，將EP管倒扣在吸水紙上輕輕控幾下，除去殘余在管口的液體。
5.將EP管倒置于吸水紙長，37度烘箱10－20分鐘，待管底無明顯液體殘留，如果管壁還殘留有液體，可以吸水紙吸掉。可以改成室溫或用電吹風，關鍵是除去管底和管壁殘余液體。
6.15000g,離心10－20分鐘,用20ul槍頭盡量吸去管底殘余的液體，此步驟要快，不然沉淀容易散開，降低蛋白回收率，一般最多幾ul或者沒有，注意不要吸到沉淀。
7.EP管倒置于吸水紙長，37度烘箱5分鐘，確認管壁和管底沒有液體殘留。
8.加入20－50ul Loading buffer，95度加熱10nim，一般沉淀會自動溶解，如果不溶，用手指輕彈管壁或用20ul槍頭輕輕吸打，注意整個操作盡量不要碰到管壁，因為管壁可能沾有殘余TCA。如果藍色的Loading buffer不變成黃色，說明殘余TCA吸棄了干凈，如果變黃，一般不影響電泳。此方法連丙酮洗這一步都省了，而且不影響電泳效果。
或者第5步和第6步改為丙酮洗:
5.加入200ul冰冷的丙酮，用手指輕彈EP管，洗去管底和管壁殘余的TCA。
6.15000g,離心10－20分鐘,倒掉上清，將EP管倒扣在吸水紙上輕輕控幾下，除去殘余在管口的液體。