alnylam公司

　　在RNAi新藥開發領域，Alnylam Pharmaceuticals是備受關注的“明星公司”。2018年，該公司研發的Onpattro（patisiran）成為首款獲得FDA批準的RNAi療法。本周，FDA又提前批準了該公司的Givlaari（givosiran）上市，這是世界上第二款獲得FDA批準的RNAi療法。而且，該公司與The Medicines Company公司合作開發的inclisiran也將在今年遞交監管申請，有望在明年成為首款降低“壞”膽固醇的RNAi療法。

　　在接二連三獲得突破之后，Alnylam公司今日在紐約舉行了研發日（R&D Day）活動，為我們展現了它為實現RNAi這一“諾獎”級技術應用潛力的宏偉藍圖。該公司預計在2020年再獲得兩款FDA批準的新RNAi療法，將有6項晚期臨床項目，并且在4大戰略治療領域（Strategic Therapeutic Areas, STArs）擁有14項臨床開發項目。而且，該公司的研發管線預計每年將產生2-4個支持IND申請的臨床前療法。到2025年，該公司希望成為擁有超過8款獲批療法，十多個后期研發項目的全球五大獨立生物技術公司之一！下面我們來看一看Alnylam如何向這一宏偉目標進發。

　　擴展RNAi技術平臺的安全性和適用范圍

　　RNA干擾（RNAi）現象是生物體本身具有的調控基因表達的方式。RNAi 機制被發現以后，它在新藥開發方面的潛力很快就得到了重視。因為這一機制的優點在于它可以靶向沉默基因組中的任何基因，具有強力和持久的作用機制。它不但能夠解決致病蛋白“不可成藥”的難題，而且在藥物合成方面可能比篩選小分子或者生成生物制劑更為簡單。

圖片來源：參考資料[2]

　　然而，RNAi療法在開發中也遇到了獨特的挑戰。這包括如何將RNAi療法靶向遞送到細胞中，避免脫靶效應產生的毒副作用等等。基于十數年的研發工作，Alnylam在靶向遞送RNAi療法和降低其毒副作用方面取得了長足的進步，Onpattro和Givlaari的獲批就是最好的證明。在研發日上，該公司進一步介紹了在增強RNAi安全性和擴展其適用范圍方面的研究進展。

　　優化安全特征

　　RNAi療法的毒副作用一直是困擾RNAi療法在廣大患者群體中應用的核心問題之一。Alnylam的增強穩定化學（Enhanced Stabilization Chemistry, ESC）遞送技術平臺通過對RNAi療法的RNA片段進行GalNAc化學修飾，不但提高其穩定性，而且可以促進RNAi療法的肝臟靶向遞送。這一技術在近日獲批的Givlaari上首次得到應用。然而，這種療法仍然有可能在肝臟沉默其它非靶點基因，從而導致肝臟毒性的發生。

　　Alnylam的研發人員發現，RNAi脫靶效應的一個主要原因是與靶點mRNA結合的siRNA序列中的一部分片段可能起到像微RNA（microRNA，miRNA）一樣的功能，它們可以與其它mRNA的3端UTR（3’ UTR）相結合，抑制mRNA的轉譯和穩定性。為了減少這一“脫靶效應”，研究人員在RNA片段中故意添加了一個無法與任何堿基配對的乙二醇核酸（Glycol Nucleic Acid，GNA）。加入GNA能夠大幅度降低RNAi療法以微RNA的形式調節其它mRNA轉譯的可能，進一步提高了RNAi療法的安全性。Alnylam將這一技術稱為ESC+技術。

圖片來源：參考資料[2]

　　在人類臨床試驗中，這項技術已經獲得概念驗證。與Vir Biotechnology公司合作開發的Vir-2218（ALN-HBV02）是一款抑制乙肝病毒蛋白表達的RNAi療法。使用ESC+技術，它不但將出現肝臟毒性的患者比例從原先的2/18（最高劑量3 mg/kg）降低到0/31（最高劑量10 mg/kg），而且能夠將乙肝病毒表面抗原（HBsAg）水平降低2.3log10倍。

▲ESC+技術得到概念驗證（圖片來源：參考資料[2]）

　　拓寬RNAi平臺適用范圍

　　如今針對肝臟靶向遞送RNAi療法的技術日漸成熟，那么如何將RNAi療法遞送到身體的其它組織呢？Alnylam公司也展現了該公司靶向中樞神經系統和眼科靶點的RNAi療法的初步結果。該公司靶向編碼淀粉樣前體蛋白（APP）的mRNA的RNAi療法在非人靈長類動物中，一次鞘內注射能夠將中樞神經系統中不同組織內的APP mRNA水平降低50%-75%。而玻璃體內注射RNAi療法也能夠劑量依賴性降低靶點蛋白的表達。

▲靶向中樞神經系統和眼科靶點的RNAi療法的表現（圖片來源：參考資料[2]）

　　而且，該公司最新開發的口服RNAi遞送技術在非人靈長類動物中也完成了概念驗證實驗。這一技術突破可能為患者帶來只需3個月或6個月口服一次的RNAi療法，為藥物研發提供了更多選擇。

▲口服RNAi療法在非人靈長類動物中的概念驗證結果（圖片來源：參考資料[2]）

　　該公司還在開發其它創新RNAi技術，其中包括同時靶向兩種不同mRNA的Bis-RNAi技術，和能夠迅速并且特異性逆轉RNAi的基因沉默效果的Reversir技術。這些技術的開發將為RNAi技術平臺提供更多可能性。

圖片來源：參考資料[2]

　　2020年有望獲批的兩款創新療法

　　在2020年，Alnylam預計兩款創新RNAi療法有望獲得FDA批準。其中一款是與The Medicines Company合作的inclisiran。藥明康德內容團隊對這款療法的最新臨床試驗結果已經做過詳細解讀，這里不再贅述。另一款有望獲批的RNAi療法是治療1型原發性高草酸尿癥（Primary Hyperoxaluria Type 1，PH1）的lumasiran。

　　PH1是一種罕見的遺傳性肝臟疾病，患者由于編碼人體丙氨酸-乙醛酸氨基轉移酶（AGT）的基因出現突變，導致AGT的缺失。這會造成患者體內產生過量的草酸鹽，累積于腎臟不能及時排出。嚴重PH1患者在身體多個部位出現草酸鹽沉積，損害腎臟及相關器官，往往需要進行肝臟和腎臟移植。

　　Lumasiran（ALN-GO1）是一種皮下注射的RNAi療法，它靶向編碼肝臟中乙醇酸氧化酶（glycolate oxidase, GO）的HAO1基因的mRNA。通過降低GO的表達來降低肝臟草酸鹽的產生。

▲Lumasiran的作用機制（圖片來源：參考資料[2]）

　　1/2期臨床試驗的開放標簽擴展研究結果表明，接受lumasiran治療的患者，平均尿液中草酸鹽的水平與基線相比降低76%，68%的患者尿液中草酸鹽的水平降低到正常范圍內。

▲Lumasiran的擴展研究試驗結果（圖片來源：參考資料[2]）

　　目前，支持lumasiran遞交上市申請的3期臨床試驗ILLUMINATE-A的頂線結果將在今年年底之前獲得。如果結果積極，Alnylam公司計劃在2020年初遞交新藥上市申請（NDA）。

　　豐富的早期研發管線

　　在研發日上，Alnylam預計，從現在到2025年，該公司的研發管線中每年將有2-4個研發項目可以遞交IND申請，有望進入臨床開發階段。除了靶向遞送到肝臟的多款療法以外，Alnylam還與再生元（Regeneron）公司合作，開發3款靶向遞送到中樞神經系統和2款靶向遞送到眼部的RNAi療法。其中，有多款在研療法有望治療患者人數眾多的大眾疾病。

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　　例如，靶向HSD17B13基因的mRNA的ALN-HSD是一款旨在治療非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的RNAi療法。人類遺傳學研究發現的HSD17B13基因的功能喪失（loss-of-function）突變能夠降低NASH和其它慢性肝病的風險，因此它是一個使用RNAi治療的理想靶點。ALN-HSD在臨床前實驗中，能夠通過一次注射，將HSD17B13蛋白水平敲低90%。目前Alnylam正在進行支持IND的臨床前研究，有望在2020年遞交IND申請。

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　　靶向編碼APP蛋白的mRNA的ALN-APP在非人靈長類動物實驗中，一次注射可以將腦脊液中的sAPPβ水平降低高達80%。APP蛋白異常切割生成的β淀粉樣蛋白被認為是導致阿爾茨海默病的重要原因之一。因此，這一療法可以用于治療早發性阿爾茨海默病患者，和其它由于APP基因突變造成的遺傳疾病，例如遺傳性腦淀粉樣血管病（Hereditary Cerebral Amyloid Angiopathy，hCAA）。

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　　RNAi療法的廣闊前景

　　誠然，要開發一款成功的RNAi療法并不容易，需要克服毒副作用、遞送手段等多方面的挑戰。不過Alnylam公司在這方面有不同的看法。在研發日上，該公司的一張圖片表明，Alnylam公司的研發項目從1期臨床進展到3期臨床試驗結果積極的成功率達到54.6%，遠遠高于新藥開發的行業平均值。這是因為所有的研發項目都基于人類遺傳學驗證過的靶點，而且生物標志物的使用是所有研究項目的一部分。一旦克服毒副作用和遞送手段方面的挑戰，成功開發RNAi療法反而變得相對簡單。這時，限制RNAi療法開發的因素將變為如何找到合適的靶點。

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　　為此，Alnylam公司已經與英國Biobank展開合作，從該組織的數據庫中發掘已經在科學文獻中報道過的基因突變。該公司表示，對Biobank數據庫的搜索已經發現大約800個基因。這些基因在人類群體中出現過純合子或雜合子功能喪失基因突變。如果這些攜帶功能喪失突變的等位基因與降低特定疾病風險相關，那么它們可能成為適于RNAi敲低的靶點。

　　Alnylam公司在研發日上還介紹了多款其它在研療法，其中包括授權給賽諾菲（Sanofi）公司合作開發，治療血友病的RNAi療法fitusiran。這款療法近日在中國獲批臨床。限于篇幅，本文不再贅述，點擊文末“閱讀全文/Read more“，即可閱覽Alnylam公司研發日PPT文件（211頁）。

　　Alnylam公司首席執行官John Maraganore博士表示，未來6年里，該公司的目標是成為世界上5大獨立的全球性生物技術公司之一。Alnylam能否釋放RNAi療法的潛能，達成這一宏偉目標？讓我們拭目以待。

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　　參考資料:

　　[1] Alnylam Announces 2020 Product and Pipeline Goals and Provides Updates at R&D Day. Retrieved November 22, 2019, from http://investors.alnylam.com/news-releases/news-release-details/alnylam-announces-2020-product-and-pipeline-goals-and-provides

　　[2] Alnylam R&D Day. Retrieved November 22, 2019, from https://www.alnylam.com/wp-content/uploads/2019/11/RD_Day2019_FINAL2_CAPELLA.pdf

　　[3] Patisiran & Vutrisiran, in Development for the Treatment of Transthyretin-Mediated Amyloidosis. Retrieved November 22, 2019, from http://investors.alnylam.com/static-files/c50ba922-bda3-4b3f-bf0d-6b2c74154fbe