大鼠大腦皮層神經元細胞培養實驗——酶消化法
實驗材料小鼠試劑、試劑盒酒精解剖液胰蛋白酶DMEM F12B27阿糖胞苷培養液儀器、耗材培養箱實驗步驟一、小鼠大腦皮層神經元原代培養步驟1. 于無菌條件下切取鼠頭并以75%酒精浸泡1 min,解剖出完整鼠腦。2. 預冷解剖液中分離去除軟膜、血管、取大腦皮質漂洗,用眼科剪將皮質反復剪切成碎塊。3. 移入培養皿中,吸除解剖液加入0.25%胰蛋白酶2 ml,37℃培養箱中消化30 min。4. 將皮層組織碎塊移入離心管,棄去剩余消化液,用接種液洗3次,每次洗滌后使組織塊充分沉降到試管底,棄去上清液。5. 最后再用接種液1 ml混懸,反復吹打(巴氏吸管)混懸液中組織塊,力度適中,至渾濁后將上清液移入培養瓶待用。6. 加入1ml接種液后再次吹打,如此反復3-4次,組織塊逐漸消化后,棄去最終殘塊。7. 收集含單細胞懸液的上清液約4-5 ml于培養瓶中,以接種......閱讀全文
大鼠肝星狀細胞培養實驗
細胞培養技術 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。
大鼠主動脈內皮細胞培養實驗——貼塊法
大鼠血管內皮細胞培養可用于:(1)血液流動性、防止血栓形成、調節血管張力等研究;(2)選擇性通透性以及免疫調節等方面研究。實驗方法原理貼塊法適用于內皮細胞產量低的、管徑較小血管的內皮細胞培養,其方法較酶消化法簡便、經濟。實驗材料雄性Wistar大鼠試劑、試劑盒DMEM胎牛血清內皮細胞生長因子肝素鈉青
常規細胞培養初代消化培養法
1.準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青鏈霉素的混合液中30~60分鐘。4.剪切:用眼科剪把
常規細胞培養初代消化培養法
1.準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青鏈霉素的混合液中30~60分鐘。4.剪切:用眼科剪把
錨定酶消化cDNA實驗
試劑、試劑盒 溶液與緩沖液引物儀器、耗材 試劑盒MPC-EPCR儀Gene PulserII 型系統實驗步驟 實驗方案 A1.通過加入下列物質來消化雙鏈 cDNA2.在 37°C 下消化 lh。3.65°C 孵育 20 min 熱失活限制性酶。4.等體積 PCI 抽提后乙醇沉淀(實驗方案 A, 第
錨定酶消化cDNA實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 溶液與緩沖液 引物 儀器、耗材 試劑盒 MPC-E PCR儀
錨定酶消化cDNA實驗
試劑、試劑盒溶液與緩沖液引物儀器、耗材試劑盒MPC-EPCR儀Gene PulserII 型系統實驗步驟實驗方案 A1.通過加入下列物質來消化雙鏈 cDNA2.在 37°C 下消化 lh。3.65°C 孵育 20 min 熱失活限制性酶。4.等體積 PCI 抽提后乙醇沉淀(實驗方案 A, 第 2 步
人滑膜細胞原代培養實驗_酶消化法
人滑膜細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)用于相應細胞生理、形態學研究;(3)用于相關疾病研究。實驗方法原理將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料滑膜組織試劑、試劑盒Ⅰ型膠原酶胎牛血清生理鹽水
人滑膜細胞原代培養實驗_酶消化法
人滑膜細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)用于相應細胞生理、形態學研究;(3)用于相關疾病研究。實驗方法原理將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料滑膜組織試劑、試劑盒Ⅰ型膠原酶胎牛血清生理鹽水
小鼠肝細胞原代培養實驗——胰酶消化法
小鼠肝細胞原代培養可用于:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。?實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEM無血清DMEM培養基胰酶PBS
大鼠肝星狀細胞培養實驗——細胞培養技術
大鼠肝星狀細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料雄性 SD 大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM
關于酶消化法的胰蛋白酶消化的基本介紹
1、加入消化液:小心吸出舊培養液,用PBS清洗(沖洗),加入適量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以蓋住細胞最好,在37℃培養箱消化2min。 2、顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若細胞質回縮,細胞間不再連接成片,表明此時細胞消化適度。 3、加入培養液:更換吸管,加入新鮮的培養
細胞傳代實驗_消化法
實驗方法原理用胰蛋白酶消化細胞,用于貼壁細胞傳代培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰蛋白酶酒精PBS儀器、耗材超凈工作臺酒精燈酒精棉球培養箱顯微鏡吸管離心管離心機實驗步驟一、傳代前準備?1. ?預熱培養用液:把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。?2. ?用75%酒精
大鼠視神經少突膠質細胞培養實驗——牛血清培養法
大鼠視神經少突膠質細胞培養可以:(1)獲得大鼠視神經少突膠質細胞;(2)用于視神經損傷修復研究;(3)用于少突膠質細胞相關課題研究。實驗方法原理采用視神經,DMEM/F12條件培養基培養,觀察細胞形態及生長,并進行免疫組織化學鑒定。實驗材料Wistar大鼠試劑、試劑盒亞硒酸鈉腐胺轉鐵蛋白胰島素甲狀腺
大鼠主動脈平滑肌細胞培養實驗_貼塊法
大鼠主動脈平滑肌細胞培養可用于:(1)獲得大鼠主動脈平滑肌細胞;(2)用于血管疾病研究;(3)用于動脈疾病研究。實驗方法原理運用組織塊貼壁法進行SD大鼠胸主動脈平滑肌細胞培養,并用倒置相差顯微鏡觀察、HE染色后形態學觀察以及用免疫組化對培養細胞進行鑒定。實驗材料SD大鼠試劑、試劑盒PBSFBSDME
大鼠星型膠質細胞培養實驗
酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大鼠星形膠質細胞原代培養后,作膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫細胞化學染色鑒定,應用缺
大鼠星型膠質細胞培養實驗
酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大鼠星形膠質細胞原代培養后,作膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫細胞化學染色鑒定,應用缺
什么是膠原酶消化法
就是用膠原酶處理消化組織達到分離細胞的目的,所用膠原酶有不同類型:1、膠原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和腎上腺組織細胞的分離。用于消化組織中連接部分使其成為單個細胞,用于哺乳動細胞的分離。2、膠原酶Ⅳ包含至少7種蛋白酶成分,分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。3、膠原酶Ⅴ包含至少7種蛋白酶成分
什么是膠原酶消化法
就是用膠原酶處理消化組織達到分離細胞的目的,所用膠原酶有不同類型:1、膠原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和腎上腺組織細胞的分離。用于消化組織中連接部分使其成為單個細胞,用于哺乳動細胞的分離。2、膠原酶Ⅳ包含至少7種蛋白酶成分,分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。3、膠原酶Ⅴ包含至少7種蛋白酶成分
組織的分離實驗_膠原酶消化分離法
實驗方法原理膠原酶是一種由細菌中提取出的酶,對膠原有很強的消化作用,適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織等。上皮細胞本身對膠原酶有一定耐性,但膠原酶對細胞間質有好的消化作用,可使上皮細胞與膠原成分脫離而不受傷害,效果甚好。此酶在鈣和鎂離子存在情況下仍有活性,故可用BSS和含有血清的培養液配制。實驗
標簽酶消化釋放標簽實驗
試劑、試劑盒溶液與緩沖液LoTE儀器、耗材Eppendorf 試管實驗步驟實驗方案 A1.向含有 Dynabeads 的每個試管中加入下列物質:2.65℃ 下酶解 Ih(每 IOmin 混合 1 次)。3.時收集上清液(含有釋放的 cDNA 標簽)4.用 LoTE 擴容到 200mL。5.等體積的
DNA作圖實驗——多種酶消化
主要用于顯示基因以及其他序列待征在基因組上位置的圖。實驗方法原理應用遺傳學技術構建能顯示基因以及其他序列待征在基因組上位置的圖。實驗材料DNA試劑、試劑盒限制酶緩沖液儀器、耗材電泳儀實驗步驟1. ?用低頻率切割的不同限制性內切酶分別完全消化DNA。?2. ?從每個反應取小份樣品作電泳分析,用已知的分
標簽酶消化釋放標簽實驗
試劑、試劑盒 溶液與緩沖液LoTE儀器、耗材 Eppendorf 試管實驗步驟 實驗方案 A1.向含有 Dynabeads 的每個試管中加入下列物質:2.65℃ 下酶解 Ih(每 IOmin 混合 1 次)。3.時收集上清液(含有釋放的 cDNA 標簽)4.用 LoTE 擴容到 200mL。5.等體
標簽酶消化釋放標簽實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 溶液與緩沖液 LoTE 儀器、耗材 Eppendorf 試管 實
大鼠神經元細胞的分離和培養實驗
實驗材料?母鼠試劑、試劑盒?BSS儀器、耗材?無菌器械顯微鏡實驗步驟 1. 殺死懷孕 18 天母鼠(常用過量 CO2 使其窒息),用無菌器械取出胚胎,放在無菌的培養皿中。2. 取下胚胎的頭,放在盛有 4 ml 不含 Ca2+ 和 Mg2+ 的平衡鹽溶液(BSS)的培養皿中。3. 從頭顱骨上取下腦,放
大鼠神經元細胞的分離和培養實驗
解離神經元培養物的制備 培養神經元的支持物的制備 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 母鼠
大鼠神經元細胞的分離和培養實驗
解離神經元培養物的制備 培養神經元的支持物的制備 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 母鼠
大鼠乳鼠成骨細胞培養實驗
酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 取材于出生2~3 d 小鼠顱骨,以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養,采用膠原酶消化法分離成骨細胞,并進行細胞接種與傳代。采用膠
大鼠乳鼠成骨細胞培養實驗
酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 取材于出生2~3 d 小鼠顱骨,以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養,采用膠原酶消化法分離成骨細胞,并進行細胞接種與傳代。采用膠
大鼠乳鼠成骨細胞培養實驗
大鼠乳鼠成骨細胞培養培養可以:(1)獲得大鼠乳鼠成骨細胞;(2)用于骨修復的細胞學機制研究。實驗方法酶消化法實驗方法原理取材于出生2~3 d 小鼠顱骨,以含20%胎牛血清的DMEM培養液進行培養,采用膠原酶消化法分離成骨細胞,并進行細胞接種與傳代。采用膠原酶消化法分離培養成骨細胞是一種可靠、簡便、快