結核分枝桿菌的三大診斷方法
由于結核分枝桿菌感染在近些年呈復燃趨勢,臨床中我們經常要對可疑患者施行結核分枝桿菌檢查,除標志性的影像學改變外,眾多檢查中實驗室檢查最為常用、便捷,下面我們一同回顧一下臨床中常用的實驗室相關的檢查方法: 病原學檢查 1、痰涂片檢查 痰標本涂片采用萋-尼抗酸染色法、免疫熒光法,具有快速、簡便等優點,不足之處在于抗酸染色鏡檢不能區分結核和肺結核分枝桿菌,而免疫熒光法在敏感度上優于抗酸染色法,但其視野范圍廣,易出現假陽性。故痰涂片檢查可用于分枝桿菌的常規篩查。通常連續檢查≥3次,可提高檢出率,痰涂片陰性不能除外肺結核感染。 2、結核菌培養 分離培養法是診斷結核病的金標準,采用改良羅氏和BactecTB系統進行培養,后者較前者可縮短檢測時間,是近年來常用的結核菌培養方式。 3、分子生物學檢測 聚合酶鏈式反應(PCR)技術可將標本中微量的結核菌DNA加以擴增,但仍有假陽性的情況發生,這......閱讀全文
結核分枝桿菌熒光定量PCR檢測方法的建立與應用
【摘要】目的 建立結核分枝桿菌的熒光定量PCR檢測方法,探討熒光 PCR檢測痰標本中結核分枝桿菌的應用價值。方法 根據結核分枝桿菌基因保守序列設計引物和探針,并構建標準品。對102例培養涂陽的結核痰液標本和45例非結核感染者的痰標本,應用熒光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法檢測結核分枝桿菌。 結果 熒
結核抵抗人群抵御結核分枝桿菌感染的固有免疫機制
結核病(TB)是由結核分枝桿菌(Mtb)引起的一類重大傳染性疾病。據世衛組織發布的最新報告,在2020年,全球有近990萬結核病患者,并有約151萬人因結核感染導致死亡。中國科學院微生物研究所劉翠華課題組長期致力于研究Mtb等重要病原菌與宿主相互作用的分子機制,近年來發表系列研究工作,在病原菌與
關于非結核分枝桿菌肺病的簡介
非結核分枝桿菌肺病是由一組非結核分枝桿菌(簡稱NTM)引起的全身疾病,主要侵犯肺部。在我國雖無全面調查,但多個省市報告,在分枝桿菌中檢出率已達4.3%。多見于老年男性。NTM還可引起院內感染,不容忽視。 結核分枝桿菌和麻風分枝桿菌以外的非結核分枝桿菌(NTM)引起的疾病稱為非結核分枝桿菌病,可
非結核分枝桿菌的DNA結構如何?
非結核分枝桿菌(Nontuberculous mycobacteria,NTM)的DNA結構與結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)相似,都是雙鏈環狀DNA分子。NTM的基因組大小約為4.5-5.5 Mb,包含約4000個基因。 NTM的基因組中包含了許多與代謝、
結核分枝桿菌的傳播途徑是什么?
結核分枝桿菌的傳播途徑主要是通過空氣飛沫傳播。當一個感染結核分枝桿菌的人咳嗽、打噴嚏或說話時,會釋放出含有結核分枝桿菌的細小飛沫,其他人吸入這些飛沫后可能會感染結核分枝桿菌。此外,結核分枝桿菌也可以通過接觸感染,即直接接觸感染者的分泌物(如痰液、唾液等)而傳播。 結核分枝桿菌還可以通過食物、水
關于結核分枝桿菌涂片檢查的簡介
結核分枝桿菌主要通過呼吸道、消化道和受損傷的皮膚侵入易感機體,引起多種組織器官結核病,其中以通過呼吸道引起的肺結核最為多見。結核分枝桿菌涂片檢查方法簡單、快速,但敏感性不高,應作為常規檢查方法。涂片陰性不能排除肺結核,連續檢查3次以上,可提高其檢出率。
結核分枝桿菌的生物學性狀
形態與染色結核分枝桿菌為細長略帶彎曲的桿菌,大小1~4X0.4μm。牛分枝桿菌則比較粗短。分枝桿菌屬的細菌細胞壁脂質含量較高,約占干重的60%,大量分枝菌酸(mycolic acid)包圍在肽聚糖層的外面,可影響染料的穿入。分枝桿菌一般用齊尼(Ziehl- Neelsen)抗酸染色法,以5%
結核分枝桿菌的直接涂片鏡檢
標本直接涂片或集菌后涂片,用抗酸染色。若找到抗酸陽性菌即可初步診斷。抗酸染色一般用Ziehl-Neelsen法。為加強染色,可用IK(intensified Kinyoun)法染色。將石炭酸復紅染色過夜,用0.5% 鹽酸乙醇脫色30s,則包括大多結核分枝桿菌L型也可著色。為提高鏡檢敏感性,也可用
結核分枝桿菌檢測的發展史
(一)發病原因 NTM以前曾命名為副結核桿菌、假性結核菌、無名分枝桿菌、未分類分枝桿菌、野種分枝桿菌、機會性分枝桿菌、非典型抗酸桿菌等。NTM迄今已發現有100多種,其中37種已見致病病例的報道。根據伯杰系統細菌學手冊(Bergys manual of systematic bacteriol
如何進行結核分枝桿菌的培養?
樣本收集: 首先,需要從患者身上收集可能含有結核分枝桿菌的樣本,如痰液、尿液、血液、骨髓等。 前處理: 收集到的樣本需要進行前處理,以去除可能抑制結核分枝桿菌生長的物質。這通常包括離心、洗滌和稀釋等步驟。 接種培養基: 將處理好的樣本接種到特殊的培養基上,如Lowenstein-Jensen
如何預防非結核分枝桿菌感染?
增強免疫力:保持良好的生活習慣,如規律作息、均衡飲食、適量運動等,有助于增強機體免疫力,降低感染非結核分枝桿菌的風險。 避免接觸污染源:盡量避免接觸可能含有非結核分枝桿菌的水、土壤、空氣等環境,以降低感染風險。 佩戴口罩:在高風險環境中,如醫院、工地等,佩戴口罩可以有效防止吸入非結核分枝桿菌
非結核分枝桿菌有哪些類型?
非結核分枝桿菌(Nontuberculous Mycobacteria,簡稱NTM)是一類與結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)相似的細菌,但它們不是引起結核病的病原體。NTM廣泛存在于自然環境中,如土壤、水和塵埃等。根據NTM的生長速度和色素產生等特點,它們可以
結核分枝桿菌熒光定量PCR檢測方法的建立與應用(一)
?????? 【摘要】? 目的 建立結核分枝桿菌的熒光定量PCR檢測方法,探討熒光 PCR檢測痰標本中結核分枝桿菌的應用價值。方法 根據結核分枝桿菌基因保守序列設計引物和探針,并構建標準品。對102例培養涂陽的結核痰液標本和45例非結核感染者的痰標本,應用熒光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法檢
結核分枝桿菌熒光定量PCR檢測方法的建立與應用(二)
?????? 1.5? 標準品的制備?????? 標準品包括:陽性定量參考品、陰性質控品、臨界陽性質控品和強陽性質控品。以結核桿菌陽性DNA樣品2μl做為PCR反應的模板,加入PCR反應液23μl,PCR反應液中含有10x PCR Buffer 3μl、25mmol/L MgCl2 1.
結核分枝桿菌熒光定量PCR檢測方法的建立與應用(三)
?????? 2.2? 瓊脂糖凝膠電泳結果?????? 痰液DNA進行驗證實驗,對所獲取的PCR產物進行測序,序列分析顯示該產物為TB核酸序列。?????? 2.3? 特異性實驗?????? 葡萄球菌等呼吸道易感菌的DNA提取物為對照模板進行Taq-man探針進行實時PCR未檢測到無熒光信號。???
關于非結核分枝桿菌的特點的介紹
非結核分枝桿菌是否有致病性可用抗煮沸試驗加以區別。非致病株煮沸1min即失去抗酸性,而致病株能耐10min,甚至高壓滅菌亦不失去抗酸性。結核分枝桿菌和非結核分枝桿菌的鑒別,除熱觸酶試檢外,可將菌苔置含鹽水小滴的玻片上研磨,前者不易乳化而后者容易乳化。 由于許多非結核分枝桿菌菌株對常用的異煙肼、
關于結核分枝桿菌的培養特性的介紹
專性需氧。最適溫度為37℃,低于30℃不生長。結核分枝桿菌細胞壁的脂質含量較高,影響營養物質的吸收,故生長緩慢。結核菌在含氧40%~50%并有5%~10%CO2和溫度為36℃±5℃,合適PH值為6.8~7.2的條件下生長旺盛。在一般培養基中每分裂1代需時18~24小時,營養豐富時只需5小時。
結核分枝桿菌的免疫性的介紹
免疫機制 結核分枝桿菌是兼性胞內寄生菌,其免疫主要是以T細胞為主的細胞免疫,CD4T細胞是主要的免疫細胞。機體對結核分枝桿菌雖能產生抗體,但此抗體無保護作用。CD4T細胞激活后釋放細胞因子刺激巨噬細胞,巨噬細胞殺傷和清除結核分枝桿菌,從而使病灶炎癥消失,機體康復。病灶的清除與病灶的大小有關,病
概述典型肺結核的診斷方法
1、結核菌檢查: 痰中找到結核菌是確診肺結核的主要依據。痰菌陽性說明病灶是開放性的。痰菌量較少可用集菌法。培養法更為精確,除能了解結核菌有無生長繁殖能力,并可作藥物敏感試驗和菌型鑒定。 2、影像學檢查: 胸部X線檢查不但可早期發現肺結核,而且可對病灶部位、范圍、性質、發展情況和治療效果作出
男性生殖系結核的診斷方法
男生殖系結核多在青壯年發生,國內統計資料年齡在20~40歲患病者占78%。男生殖系結核一般呈慢性病變過程,常是雙側性疾病,但病程中可先后出現。前列腺與精囊結核多無明顯癥狀,常在引起附睪結核出現癥狀而進行直腸指檢時才發現前列腺、精囊有結核浸潤和結核硬節。前列腺實質的破壞可使精液數量減少,因此生育能
非結核分枝桿菌肺病的細菌學研究的幾種方法
1、Bactec 460 TB系統 在含有C14-棕櫚酸為底物的7H12培養基內加入選擇性抑制劑NAP(ρ-硝基-α-乙酰氨基-β-羥基丙酮)5μg/ml,培養后經Bactec 460 TB檢測,結核分枝桿菌群對NAP l00%敏感,非結核分枝桿菌99.5%耐藥,從而達到快速鑒別的目的。表明N
關于非結核分枝桿菌病的預后介紹
各種NTM引起的非結核分枝桿菌肺病預后不同原發非結核分枝桿菌肺病有敏感藥物治療的有手術適應證的、年齡較輕的非播散型的、未與人型結核菌或HIV等混合感染的非結核分枝桿菌肺病預后較好,如堪薩斯分枝桿菌肺病多為原發性,對多種藥物敏感預后較好。反之,繼發的缺少敏感藥物治療的沒有手術適應證的、年齡較大的播
關于非結核分枝桿菌病的檢查介紹
1.細菌學檢查 痰和支氣管肺泡灌洗液涂片和培養為最常見的檢查方法,涂片抗酸染色(Ziehl-Neelsen)陽性,但檢出率低,且不能與結核分枝桿菌作鑒別。需作培養和生化檢查如煙酸試驗,過氧化氫酶試驗和芳香硫酸酯酶活性等。 但檢驗時,不能及早得到檢驗結果,近年有一些快速培養和菌型鑒定方法已有臨
關于非結核分枝桿菌病的基本介紹
非結核分枝桿菌(NTM)是指結核桿菌及麻風分枝桿菌以外的所有分枝桿菌,也稱為環境分枝桿菌。非結核分枝桿菌病是指人類感染NTM所引起相關組織或臟器的病變。NTM屬條件致病菌,健康人的呼吸道可有某些類型NTM寄殖,當口腔和呼吸道衛生狀況改善后可消失。 非結核分枝桿菌廣泛存在于自然界的土壤,塵埃、水
結核分枝桿菌的形態染色與培養特點
結核分枝桿菌的形態染色結核分枝桿菌細長且直,不同種可呈現絲狀、球狀、串珠狀等多形性。抗酸染色法是以5%石碳酸復紅加溫染色后再經3%鹽酸乙醇脫色,再以美藍復染,結核分枝桿菌能抵抗酸酒精脫色,被染成紅色,為抗酸染色陽性。結核分枝桿菌的培養特點培養特點為專性需氧、營養要求高、生長緩慢,常用羅氏固體培養基,
非結核分枝桿菌的耐藥性如何?
非結核分枝桿菌(Non-tuberculous mycobacteria,簡稱NTM)是一類廣泛存在于環境中的細菌,其中一些種類可以引起人類和動物的感染。NTM的耐藥性情況因菌種和藥物而異,以下是一些常見的耐藥性情況: 對一線抗結核藥物的耐藥性:NTM對一線抗結核藥物(如異煙肼、利福平、吡嗪酰
關于結核菌(分枝桿菌)培養的簡介
結核分枝桿菌(M.tuberculosis),俗稱結核桿菌,是引起結核病的病原菌,可通過呼吸道、消化道或皮膚損傷侵入易感機體,引起多種組織器官的結核病,其中以通過呼吸道引起肺結核為最多。結核病是目前世界上首要的感染性疾病,病程長,病死率高,是全球關注的公共衛生和社會問題,因此快速準確檢測結核菌感
治療非結核分枝桿菌病的相關介紹
1.鳥胞內復合體分枝桿菌 (1)免疫健全者 ①小結節狀/支氣管擴張性病變:克拉霉素或阿奇霉素+EMB+RFP。②空洞性病變:克拉霉素或阿奇霉素+EMB+RFP±鏈霉素或阿米卡星。③晚期(重癥)或原先治療過敏患者:同空洞性病變的治療,但去除RFP。 (2)免疫抑制者(HIV/AIDS) ①最初
結核分枝桿菌的耐藥性如何檢測?
細菌學檢測:包括痰液的細菌學檢測,通過培養痰液樣本,觀察結核分枝桿菌的生長情況,并測試其對不同抗結核藥物的敏感性。 分子生物學檢測:如耐藥基因芯片的分子生物學檢測、Xpert檢測、線性探針等。這些方法能夠快速準確地檢測出結核分枝桿菌的耐藥基因,從而確定菌株對抗結核藥物的敏感性。 影像學檢查:
非結核分枝桿菌感染的癥狀有哪些?
肺部感染:咳嗽、咳痰(可能帶血)、胸痛、呼吸急促、發熱等。 淋巴結感染:淋巴結腫大、疼痛、壓痛等。 皮膚感染:皮膚紅腫、疼痛、膿皰、潰瘍等。 骨骼和關節感染:關節疼痛、腫脹、活動受限等。 軟組織感染:局部紅腫、疼痛、觸痛等。 中樞神經系統感染:頭痛、發熱、惡心、嘔吐、頸部僵硬等。