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  • 【技術方案】微孔板內細胞固定和抗體染色自動化解決方案

    以往,我們使用顯微鏡做熒光成像的時候,常常將樣本放在載玻片上。但是隨著樣本量增加,細胞實驗使用 96 孔和 384 孔微孔板逐漸成為趨勢,這與高內涵(high-content analysis,HCA)分析不謀而合。高內涵分析是一種高通量識別并分析由與細胞相互作用的物質所帶來的細胞表型變化的方法。這些物質包括小分子、受體配體和 RNAi,它們可能引起——增加或減少特定蛋白質產生的表型變化、G 蛋白偶聯受體(GPCR)的內化、核激素受體易位、細胞凋亡、蛋白質翻譯后修飾的變化以及細胞形態的變化。雖然通過明場成像(透射光)可以觀察一些細胞形態變化,但更多的形態學變化需要使用更有針對性的染色方案,比如抗體或者小分子熒光探針。 BioTek Cytation C10 共聚焦微孔板成像檢測系統支持高內涵成像與分析無論使用何種抗體和熒光染料的組合,對于低背景的特異性染色,都需要一系列的試劑添加和清洗步驟來去除未結......閱讀全文

    ELISA常見問題及解決方案

      一.背景高或者非特異性染色   原因   解決方案   抗體的非特異性結合   更換封閉液(例如,使用酪蛋白替代BSA);封閉結束后不要清洗;倒出封閉液,吸水紙上吸干殘留液體后直接進行下一步。   未充分清洗酶標板   確保在清洗過程中每個微孔都充滿緩沖液、清洗儀器正常工作。各步

    ELISA常見問題及解決方案

    ?一.背景高或者非特異性染色?原因解決方案抗體的非特異性結合更換封閉液(例如,使用酪蛋白替代BSA);封閉結束后不要清洗;倒出封閉液,吸水紙上吸干殘留液體后直接進行下一步。未充分清洗酶標板確保在清洗過程中每個微孔都充滿緩沖液、清洗儀器正常工作。各步驟之間清洗3~5次,不要增加清洗次數。清洗完成后,將

    技術和方案18-染色質免疫沉淀

    試劑、試劑盒甲醛甘氨酸TBS蛋白酶抑制劑裂解緩沖液免疫共沉淀洗脫液TESTE儀器、耗材超聲波粉碎儀實驗步驟1.培養要分析的細胞。每一個樣品,需要在三角瓶中培養 50~100ml 細胞至 OD600 大約為 1。2.甲醛處理細胞交聯蛋白質和 DNA。加甲醛到細胞中至終濃度為 1%(37% 的甲醛按 1

    染色質免疫共沉淀研究

    真核生物的基因組DNA以染色質的形式存在,研究蛋白質與DNA在染色質環境下的相互作用是闡明真核生物基因表達機制的基本途徑。與傳統的EMSA技術相比,染色質免疫沉淀技術(ChIP)能真實完整地反映結合在DNA序列上的調控蛋白,是目前研究體內DNA與蛋白質相互作用的最佳方法。染色質免疫沉淀技術(chro

    細胞內細胞因子染色步驟

    1.樣本準備:1) 收集細胞。經刺激和阻斷處理的細胞(具體處理方案請參考文獻進行),加細胞染色Buffer(或含0.1%BSA的PBS)制成單細胞懸液,調整細胞濃度約為1×107/ml。2) 取100μl細胞/管(約1×106細胞),分別加到做好標記的流式管底部。2.固定:1) 如需要表面染色,選用

    細胞常用固定劑和固定方法

    培養細胞常用固定劑有4%多聚甲醛磷酸緩沖液、丙酮、甲醇和95%乙醇。在固定之前需用37℃預熱的PBS輕洗細胞。1.4%多聚甲醛磷酸緩沖液 固定10—20分鐘,干燥。2.甲醇 10‰甲醇固定5—20分鐘,自然干燥。3.丙酮 4℃冷丙酮固定組織穿透性和脫水性強,抗原保存好,很少用于組織切片,常用于培養細

    固定細胞的PI單染色法

    方法一1.收集細胞(1~5)×106個,500~1000r/min離心5min,棄去培養液。2.3ml PBS洗一次。3.離心去PBS,加入冰預冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。4.離心棄去固定液,3ml PBS重懸5min。5.400目的篩網過濾1次,500~1000r/min離心5min,棄去P

    多功能微孔板檢測儀

      多功能微孔板檢測儀是一種用于基礎醫學、臨床醫學、藥學領域的分析儀器,于2016年10月24日啟用。  技術指標  設備可以實現以下功能:時間分辨熒光(頂部和底部);熒光強度(頂部和底部);熒光偏振(頂部和底部);化學發光檢測(頂部和底部);閃爍化學發光檢測、慢速化學發光檢測以及增強化學發光檢測;

    微孔板振蕩器的參數

      1. 可放2塊或者4塊微孔板的混合器  2. 速度可調,300~1400rpm  3. 對微量樣品進行高效混合  4.無刷直流電機驅動,可提供柔和或強力振蕩  5. 可選配1.5ml/2.0ml離心管架  6. 操作便捷的彈簧固定架,可方便快速安裝微孔板  7. 振蕩轉速范圍:300-1400

    如何保養微孔板振蕩器?

      微孔板振蕩器結構緊密且占地面積小,可應用于免疫測定和染色實驗等各種實驗,采用直流無刷電機驅動振蕩,可在室溫低的環境里或培養箱里使用,主要用于酶標板、細胞培養板以及1.5/2.0ml離心試管等溶液進行混勻振蕩。它使用方便、噪音低、無污染;溫度、振蕩、時間LCD顯示,美觀大方,操作簡單,廣泛應用于各

    什么是微孔板離心機

    微孔板離心機是專門用于微孔板而研制的,方便離下掛壁液滴,使用時可將微孔板從頂部插槽垂直裝入離心機轉子內,液體在表面張力的作用下保持在微孔板底部,不會漏液。發展過程:隨著科學技術的迅猛發展,為了使實驗過程更加快速,實驗結果更加精確,多數實驗室采用了微孔板離心機,它以其操作簡便,結果清晰的特點被世界先進

    微孔板孵育器你了解多少?

    微孔板孵育器產品簡述:BK100-4A微孔板恒溫孵育器采用微處理技術結合PID控制方式而形成的微孔板恒溫孵育器。它具有體積小、重量輕;溫度、時間LCD顯示,美觀大方,操作簡單等特點。主要用于酶標板(96孔/384孔板)、細胞培養板(24孔板、48孔板、96孔板等)等溶液在適當溫度下進行培養孵育,常用

    PerkinElmer:提供高性能微孔板檢測

      2013年6月6日,實驗室自動化與篩選協會2013亞洲會展在上海金茂君悅大酒店盛大開幕。本次年會圍繞“藥物研發和實驗室技術”這一主題展開,吸引了來自全球藥物研發領域的相關科研人員參會。PerkinElmer公司專注于改善人類及環境的健康和安全,在SLAS 2013展會上展

    微孔板離心機特點詳解

    孔板離心機是專門用于微孔板而研制的,方便離下掛壁液滴,使用時可將微孔板從頂部插槽垂直裝入離心機轉子內,液體在表面張力的作用下保持在微孔板底部,不會漏液。微孔板離心機產品特點?1、適用范圍廣:適用于帶裙邊及不帶裙邊的各種標準PCR微孔板,可在冷庫中使用。2、離心功能強:瞬時加速至2500rpm,全自動

    多用途微孔板檢測儀的技術指標

      技術指標  1.應用范圍:具備光吸收,熒光強度,超敏化學發光,均相時間分辨熒光,熒光偏振等功能  2.光源:采用將高能氙燈和高能LEDs結合的光譜融合技術,可在整個光譜范圍內提高檢測信號和靈敏度  3.檢測器:使用冷PMT和硅光電二極管  4.讀取高度優化:頂部檢測可自動聚焦,自動優化讀取高度 

    微孔板檢測儀的主要規格及技術指標

      1、基于SBS微孔板,樣品用量少,可適配24孔、96孔和384孔等多種板型,預置多種孔板的型號規格參數,同時可自定義孔板;  2、基于四光柵的吸光度和熒光強度檢測,可選擇的波長范圍為250-850nm,最小步長為0.1nm,帶寬僅為5nm,檢測限分別為96孔或384孔0-4OD和1fmol每孔;

    使用Microlute-P3-PL微孔板去除板去除蛋白質和磷脂

    P3板去除蛋白質類似,確定了從生物樣品中去除不需要的磷脂。?P3 PL板結合了我們備受推崇的蛋白質沉淀技術和可以選擇性去除血清樣品中離子化磷脂的部分。已知這些會引起離子抑制,在使用最敏感的儀器(例如三重四極桿和TOF-MS單元)進行LC-MS分析時,可能導致假陽性或假陰性結果。?該裝備易于使用且遵循

    Tecan與Reinnervate合作開發3D細胞培養自動化解決方案

      近期,瑞士Tecan與3D 細胞培養領域領導品牌-美國Reinnervate簽署了一項市場戰略合作協議,該項目以Tecan公司Freedom EVO?全自動化液體處理工作站和Reinnervate公司Alvetex? 3D細胞培養技術為基礎,致力于提供一系列細胞培養自動化解決方案。   A

    島津制藥行業自動化解決方案上新啦!

    ????點擊查看視頻:https://mp.weixin.qq.com/s/556aLDSgs2DdZFUoV7Jdmg本文內容非商業廣告,僅供專業人士參考。關于島津? ? ? 島津企業管理(中國)有限公司是(株)島津制作所于1999年100%出資,在中國設立的現地法人公司,在中國全境擁有13個分公

    微孔板讀板機和SimpleStep-ELISA試劑盒定量白細胞介素8

    前言THP-1 是人外周血的單核細胞系,最初來源于急性單核細胞性白血病患者,常被用來體外研究巨噬細胞功能。 它通常屬于懸浮細胞,當用 PMA 處理后可分化為貼壁生長的巨噬細胞。THP-1 能釋放許多細胞因子,其中包括白細胞介素 -8(IL-8),一種能被許多類型細胞分泌的、在調節急性炎癥反應

    流式抗體(熒光抗體)細胞染色步驟與注意

    染色緩沖液(BSA)的配制:PBS含有1% FBS和0.09% NaN3,置于冰上或4度冰箱備用。準備單細胞懸液:淋巴組織、骨髓、血液或培養的細胞。用冰染色緩沖液洗細胞2次,離心細胞,用冰染色緩沖液重懸細胞,使終濃度為2×107細胞/ml。各取50ul(106細胞)細胞懸液到2個圓底的Ep管中。根據

    固定化細胞和固定化酶比較

    固定化細胞:優點: 固定化細胞內酶的活性基本沒有損失。缺點: 固定化細胞只能用于生產細胞外酶。固定化酶:優點:容易與水溶性反應物和產物分離。缺點: 一種酶只催化一種化學反應,而產物形成是通過一系列酶促反應得到的.

    固定化細胞技術簡介

    所謂固定化細胞技術,就是將具有一定生理功能的生物細胞,例如微生物細胞、植物細胞或動物細胞等,用一定的方法將其固定,作為固體生物催化劑而加以利用的一門技術。

    革蘭氏染色法染色的目的和火焰固定的目的

    細菌染色之后才能在顯微鏡下看到形態,也可用于區分革蘭氏陽性菌和陰性菌,G+細菌呈現革蘭氏染液的藍紫色,而G-細菌呈現沙黃或復紅的紅顏色。火焰固定目的是防止染色后洗滌、復染時細菌脫片。

    賽默飛Cytomat-2-CliN系列細胞培養箱,增強自動化培養能力

      分析測試百科網訊 隨著制藥行業對生物制品開發關注度不斷提升,科學家們需要一套可靠、靈活的自動化培養解決方案以支持未來基于細胞和細胞衍生藥物的探索、開發和加工應用。賽默飛在歐洲SLAS 2019會議中展示其最新一代自動化培養箱。  賽默飛在環境培養室和細胞培養技術方面擁有50多年的經驗,最新發布的

    超聲引導椎管內麻醉用于椎板切除內固定術后病例報告

    在麻醉領域,超聲引導外周神經阻滯和血管穿刺目前已得到廣泛應用,但超聲引導椎管內麻醉的發展比較緩慢,因為在行腰椎管的超聲掃查時,目標組織的位置相對比較深,骨性組織阻礙了超聲束進入椎管,導致獲得的聲窗較窄。盡管存在技術上的困難,隨著超聲設備和成像技術的提高,近年來已有一些研究應用超聲技術輔助確定椎間隙水

    HuTech——快速智能的抗體人源化解決方案

    傳統的同源建模技術對抗體進行人源化改造,主要是基于蛋白質一級結構的相似性同時結合已有的蛋白質晶體結構進行同源模擬。現有的多種同源建模技術大部分都沒有對已有的抗體序列數據進行分析,在人源化改造過程中存在突變位點不確定的問題,同時抗體特性如表達水平、關鍵氨基酸的后期修飾預測等無法提前預知。?利用噬菌體展

    HuTech—快速智能的抗體人源化解決方案

       傳統的同源建模技術對抗體進行人源化改造,主要是基于蛋白質一級結構的相似性同時結合已有的蛋白質晶體結構進行同源模擬。現有的多種同源建模技術大部分都沒有對已有的抗體序列數據進行分析,在人源化改造過程中存在突變位點不確定的問題,同時抗體特性如表達水平、關鍵氨基酸的后期修飾預測等無法提前預知。  

    細胞因子監測解決方案(一)

    蛋白濃度太低檢測不出來,我該怎么辦?默克生命科學?默克生命科學?3月4日近期,有關新型冠狀病毒的研究將「細胞因子」推至大眾面前,他們在阻擊病毒的工作中各司其職:?初級細胞因子(I 型和 III 型干擾素、IL- 1β、IL-18、TNF-α、IL-6 和 IL-33)對抗病毒信號進行快遞響應,奮力阻

    細胞因子監測解決方案(二)

    應用方案二創領阿爾茲海默癥標志物新發現隨著人類壽命的延長和老齡化進程的加速,阿爾茨海默癥(AD)成為全球最為重要的公共衛生問題之一。預計 2030 年,阿爾茨海默癥患者人數將增加至 7,000 多萬,全球每三秒鐘就有一個新增確認病例。雖然無法阻止疾病的發生,但是早期干預與治療可以延緩病狀的出

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