肌酐（creatinine，CRE）是人體肌肉代謝的產物，包括外源性和內源性兩種，在正常情況下，人體內肌酐的含量基本穩定。若腎臟功能受損時，肌酐的正常排泄受到阻礙，致使血清中肌酐含量增加，血清中肌酐含量升高意味著腎功能受到損害，因此血清肌酐是腎臟功能的重要指標。本期對話，金寶請來了馮仁豐教授同大家分享肌酐檢測相關的熱點話題。
01
金 寶：目前檢測肌酐的分析大致上有幾個方法？
馮教授：環繞克服干擾問題，肌酐檢測的方法學從歷史上開始大致上可以分為：Folin的去蛋白Jaffe反應檢測；1960年代起不除蛋白的Jaffe直接檢測終點法；Jaffe速率法（未補償Jaffe方法）；Jaffe速率法（補償Jaffe方法）；采用系列酶的比色法（酶法，以羅氏產品為代表）；強生干片酶法等（干片酶法）。
02
金 寶：從上世紀50年代起，推出的自動化肌酐檢測方法，與以往相比有什么不同？
馮教授：先打個比方，以往早餐吃豆漿是一定要處理黃豆，將黃豆浸泡、磨成漿、分離去除豆渣、煮沸豆漿后飲用。經典肌酐堿性苦味酸方法是，必須將肌酐從樣品中分離（這是當時檢驗條件很差之故），然后在加入堿性苦味酸反應、比色測定。今天家用的豆漿機，實際上是將浸泡的黃豆一起打碎后，不過濾直接煮沸后，就吃了！這表面上看起來像一杯豆漿，其實是混合物。
自動化要求推動直接使用樣品。臨床實驗室依然必須檢測肌酐！但是檢測的樣品是肌酐在內的一個復雜混合體！即需要直接采用血清或血漿的肌酐Jaffe反應方法。為了可直接檢測，不出現因蛋白存在產生沉淀，可用即可，為此調整堿性苦味酸內各個組分的用量、以及調整樣品和試劑的比例等。為了避免出現蛋白沉淀，也使用了表面活性劑，但自動化初期階段還是Jaffe反應的終點法。
很快就認識到樣品中的蛋白為主的非肌酐組分，對肌酐結果影響很大。出現了使用以血清為基礎的校準品，作為肌酐克服基質效應的措施出現了，開始研究Jaffe反應過程，確定肌酐與堿性苦味酸反應很快，干擾作用反應則慢得多，提出反應初期的Jaffe反應速率法檢測肌酐。這應該是現今依然被廣泛使用的分析儀上的肌酐Jaffe反應的檢測方法基礎。
現今的直接肌酐Jaffe反應檢測，所有的檢測方法全部為反應初期的速率法。大多采用了以血清為基礎的校準品，都采用或宣稱SRM 914a為原始第一標準，對報告結果不做任何數學處理（即為非補償Jaffe方法）。所有現今的堿性苦味酸檢測方法，均宣稱：反應線性良好，是速率法，可溯源至SRM914a，與其他公司產品具有良好的相關等。
03
金 寶：肌酐檢測現狀如何？
馮教授：臨床需要準確的血清肌酐檢測用于計算估計腎小球濾過率(eGFR)很關鍵，關系到全球衛生保健，致力于改善慢性腎病的診斷和治療。校準的標準化，如實施校準的溯源性至較高等級的參考檢測方法和參考物質，但不能糾正大量常規方法的分析干擾（非特異性偏倚）。補償的Jaffe方法假設了非肌酐的色素干擾在樣品間是恒定的，這過于簡單了。盡管得到的結果與參考方法（核素稀釋-質譜分析）很接近；使血漿蛋白的假性肌酐影響最小，但無法回避堿性苦味酸方法對非肌酐色素的敏感性。
羅氏公司目前的補償肌酐方法和酶法，都已經將患者樣品的檢測結果可溯源至ID/MS（核素稀釋質譜法）。但是，必須注意：不可隨意將羅氏的補償法與酶法互相進行患者樣品檢測結果的比較！羅氏永遠是：補償法的自行比較！或是酶法不同系統間的自行比較！
全世界所有診斷產品公司的肌酐檢測，都聲稱他們的肌酐檢測具有溯源性！但是，常規方法的分析非特異性，即沒有能力真正檢測單一肌酐的，實施溯源性不能解決與檢測非特異性有關的分析干擾。因為標準化沒有糾正分析非特異性問題。
04
金 寶： 肌酐檢測標準化的趨勢將如何？
馮教授：
肌酐的溯源性
也許在國內的任何一個實驗室，使用的肌酐檢測試劑盒，還找不出認為沒有溯源性的！這是大家的回答。自選試劑盒、任意搭配校準品，試劑廠商顯示的報批文件證實說：我國的藥監部門認可了他們的試劑盒具有溯源性、他們的校準品有溯源性。你承認嗎？在溯源性認識上模糊、錯誤的情況，從國家到省市藥監審批部門，到ISO 15189的實驗室認可組織、到基層的臨床實驗室，簡直一團糟！
實現溯源性是針對實驗室對新鮮病人樣品檢測結果的。要使檢測結果具有溯源性，一定要使用具有溯源性的檢測系統。即：儀器、試劑盒、校準品、操作程序固定組合為檢測系統。這個固定的檢測系統經與參考系統的新鮮病人標本比對，獲得國際認可具有溯源性證書的，才有資格認為具有了對病人樣品可以檢測出實現溯源性的可靠結果。歷史上，肌酐檢測一直使用美國標準和測量研究院[NIST，原美國國家標準局（NBS）]發布了SRM 914a為肌酐參考純物質起，所有試劑盒廠商立即以該標準參考物質為準，校正自己的肌酐標準液。以這樣的做法，在美國、在我國，都很快就認可了：不論試劑盒的方法學反應原理，只要標準液以SRM 914a校正的，都被認可。進而，也變成了具有溯源性。標準液是這樣，以血清為基礎的校準品的定值，只要可追溯源至SRM 914a的，都被說成有溯源性。
肌酐“溯源性”≠病人標本結果的可比性
現實問題是：病人標本的肌酐檢測結果間一直對不攏。實驗室間的室間比對表面上很好，可惜國內的這樣的比對無法相信：調查標本不是天然患者標本、實驗室間互相通氣嚴重。
就是非常正規的大公司，如羅氏診斷，他們提供了肌酐的Jaffe方法、Jaffe補償方法、酶法等試劑盒。它們均有溯源性，但是互相間有很明顯的差異。
全球趨勢
由于Jaffe試劑成本實在便宜，酶法試劑要貴得多，全球依然留戀廉價的Jaffe試劑，想盡辦法予以保留，近期的所謂校準補償的Jaffe速率（扣除空白速率）方法便是一個代表。酶法的分析性能已經被大眾認可，對病人標本的檢測結果可靠性基本被肯定。是成本第一，還是質量第一是當今的呼聲。相信隨著我國經濟發展，臨床需要真正的肌酐結果，必然會使肌酐檢測方法向酶法轉移。期望臨床實驗室不要再等待，為了廣大腎病患者的利益，盡早使用酶法檢測肌酐。