實驗概要
mESCs傳代
主要試劑
細胞基礎培養液、DPBS、mES培養液A、mESCs培養液B、0.25% Trypsin
主要設備
35 mm、60 mm、100 mm培養皿、15 mL離心管、50 mL離心管、凍存管、倒置顯微鏡、離心機
實驗步驟
（1）傳代前一天準備好飼養層細胞，飼養層細胞要求接種密度大致為2×105細胞/cm2，切忌密度過高。
（2）mESCs一般培養2～3天需要傳代，盡量不超過3天傳代。
（3）傳代之前首先在37℃水浴鍋中預熱0.25%Trypsin、細胞基礎培養液、DPBS和mESCs培養液A或者B。
（4）吸棄細胞培養液，然后用DPBS輕輕沖洗一遍貼壁細胞，棄掉DPBS之后加0.25%Trypsin，放在培養箱中消化3～4 min，消化過程中在顯微鏡下觀察消化的效果，當克隆成為單個細胞時即可加入等體積的細胞基礎培養液終止消化。
（5）將終止消化后的細胞懸液移到15 mL的離心管中，室溫1000r/min離心5 min，棄上清。
（6）用適量的mESCs培養液A或者B重懸離心后的細胞，將其接種到新的飼養層細胞上。