全自動Wes蛋白印跡讓大分子量蛋白不再“難測”
不管是基礎研究還是轉化醫學，特定樣本中特定蛋白質的表達情況可為研究者提供豐富的生物學信息。如臨床樣品中疾病特異性Biomarker的檢測定量可作為疾病診斷、病患分型及療效評估的重要參考依據；藥物篩選活動中，也常常通過藥物靶標及其下游通路蛋白的表達量或修飾狀態來評估潛在的藥效。著名的抗白血病藥物Gleevec（格列衛）即以酪氨酸激酶為作用靶標。 特定蛋白質的檢測定量常常基于免疫學手段，如Elisa、luminex、免疫組化、Western Blot等等。前三項技術直接以原始樣品進行檢測，靶標蛋白與樣品雜蛋白無分離步驟，由于生物學樣品的復雜性及抗體質量導致的非特異性結合，常常產生假陽性信號而無法識別剔除。而Western Blot技術采取先分離后檢測的策略，不僅能將靶標蛋白定量，同時具備根據分子量信息進行靶標“鑒定”的優點。因此，即使由于樣品復雜性及抗體質量導致非特異信號，我們仍然可以根據分子量信息將真正的靶標進行檢測定量。翻......閱讀全文
尿液蛋白質定量檢測方法
麗春紅-S法 尿液標本中的蛋白質與麗春紅-S染料混勻后一起被三氯醋酸沉淀，將沉淀物溶解于堿性溶液中，此時溶液呈紫色，顯色深度與蛋白質濃度成正比。 試劑三氯乙酸-麗春紅-S試劑原液：稱取麗春紅-S 1.0 g，加入到1 000 ml 300 g/L三氯乙酸中溶解。 三氯乙酸-麗春紅-S試劑應
尿液蛋白質定量檢測操作
先做尿蛋白定性試驗，以適當稀釋標本。在試管中加入100μl標本，再加入1 ml三氯乙酸一麗春紅-S應用液，混勻后以3 000 r/min離心15分鐘，吸去上清液，倒置于潔凈濾紙上。在沉淀中加入0.2 mol/L氫氧化鈉溶液l ml，用560 nm波長測定其吸光度，查標準曲線的蛋白含量。
尿液蛋白質定量檢測試劑
蛋白沉淀液：稱取磷鎢酸7.5 g，加入30 ml蒸餾水、95%乙醇385 ml、濃鹽酸25 ml。 雙縮脲液：(1)稱取枸櫞酸鈉34.6 g，無水碳酸鈉20 g，加入120 ml蒸餾水使其溶解；(2)稱取硫酸銅3.46 g，加入20 ml蒸餾水使其溶解。將(1)、(2)混合，加入蒸餾水至200
蛋白質定量檢測方法——BCA法
BCA（Bicinchoninc acid procedure，4,4’-二羧-2,2’-二喹啉）法與Lowry法相似，主要差別在堿性溶液中，蛋白質使Cu2+轉變Cu+后，進一步以BCA 取代Folin試劑與Cu+結合產生深紫色，在波長562 nm有強的吸收。 它的優點在于堿性溶液中B
蛋白質檢測和定量方法
蛋白質定量方法最早出現在20世紀50年代早期，當時物理學家和化學家進入生物學領域，并將他們的技術應用于蛋白質的分析和測量。 Lowry蛋白質分析是第一個確定溶液中蛋白質總水平的生化分析。不久之后，該測定通過其他測量方法引入，包括紫外（UV）系統和氨基酸分析。所有這些方法都能夠表征水中的蛋白質或非
蛋白質定量檢測方法——酚試劑法
取6支試管分別標號，前5支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液，最后一支試管加待測蛋白質溶液，不加標準蛋白溶液，在室溫下放置30分鐘，以未加蛋白質溶液的第一支試管作為空白對照，于650nm波長處測定各管中溶液的吸光度值。優點：靈敏度高，對水溶性蛋白質含量的測定很有效。缺點：①費時，要精確控制操作時間；
蛋白質定量檢測方法——紫外吸收法
大多數蛋白質在280nm波長處有特征的最大吸收，這是由于蛋白質中有酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸存在，可用于測定0.1～0.5mg/mL含量的蛋白質溶液。取9支試管分別標號，前8支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液，1號試管不加標準蛋白溶液，最后一支試管加待測蛋白質溶液，而不加標準蛋白溶液，每支試管液體總
NEJM：癌癥藥物研發的新型靶標
SALL4基因負責調節胚胎干細胞的自我更新，是許多癌癥中的關鍵基因，例如肝癌。現在，哈佛干細胞研究所HSCI的研究人員，在肝癌模型中對SALL4基因進行研究，找到了阻斷其活性的新型藥物。這項研究發表在新英格蘭醫學雜志(New England Journal of Medicine)上。
蛋白質定量
Quantitative Determination of Peptides by Sulfhydryl (-SH) Groups?New?(Contributed by David Van Horn, Dept. of Chemistry, UC Berkeley Greg Bulaj, Dept
蛋白質的檢測和定量方法以及進展
國家標準物質資源平臺：蛋白質定量方法早出現在20世紀50年代早期，當時物理學家和化學家進入生物學領域，并將他們的技術應用于蛋白質的分析和測量。 Lowry蛋白質分析是個確定溶液中蛋白質總水平的生化分析。不久之后，該測定通過其他測量方法引入，包括紫外（UV）系統和氨基酸分析。所有這些方法都能夠表征水中
蛋白質的檢測和定量方法以及進展
國家標準物質資源平臺：蛋白質定量方法最早出現在20世紀50年代早期，當時物理學家和化學家進入生物學領域，并將他們的技術應用于蛋白質的分析和測量。 Lowry蛋白質分析是個確定溶液中蛋白質總水平的生化分析。不久之后，該測定通過其他測量方法引入，包括紫外（UV）系統和氨基酸分析。所有這些方法都能
蛋白質定量檢測方法——雙縮脲法
雙縮脲法是一個用于鑒定蛋白質的分析方法。雙縮脲試劑是一個堿性的含銅試液，呈藍色，由1%氫氧化鉀、幾滴1%硫酸銅和酒石酸鉀鈉配制。當底物中含有肽鍵時（多肽），試液中的銅與多肽配位，配合物呈紫色。可通過比色法分析濃度，在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑒定反應的靈敏度為5-160mg/ml。鑒定反應蛋
上海藥物所發布免費在線藥物靶標預測平臺
藥物靶標的識別與驗證是藥物發現過程中至關重要的第一步，在藥物研發過程中，30%-40%的在研藥物由于藥物靶標選擇的不恰當而以失敗告終。因此，發展一種高效的計算方法來預測新的藥物靶標就顯得尤其重要。 最近，中國科學院上海藥物研究所朱維良研究組發布免費在線藥物靶標預測平臺D3TPredictor
Cell子刊：詳解熱點藥物靶標
美國Scripps研究所TSRI的科學家確定了一個熱點酶與一些重要蛋白相互作用時的結構，這些蛋白涉及了神經退行性疾病和胰島素抵抗。這種酶就是C- jun氨基末端激酶JNK，它對神經細胞的存活有關鍵影響，被視為治療帕金森癥、阿爾茨海默癥、肌萎縮側索硬化ALS等大腦疾病最具價值的藥物靶點之一。該
單靶標or多靶標：新冠檢測試劑該如何選擇？
目前，國家藥品監督管理局（NMPA）批準的新型冠狀病毒檢測試劑中，大部分采用的方法為實時熒光RT-PCR。它具有簡便快速、特異性強、靈敏度高等特點。那么，其高靈敏度和高特異性的基礎究竟是什么呢？讓我們來一探究竟。01試劑的檢測性能如何體現？檢測性能評價中最主要的就是靈敏度與特異性。PCR擴增產物以指
蛋白質定量實驗
考馬斯亮藍蛋白質濃度分析法 堿性銅還原分析法 胺衍生法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 蛋白質分子中的芳香族氨基酸酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸殘基，其化學結構中
蛋白質定量實驗
試劑、試劑盒 考馬斯亮藍 G250乙醇磷酸實驗步驟 (1) 準備 100~1500 ug/ml 的標準品, 溶于 Bradford 法相兼容緩沖液中。對于較稀的樣品，可能通過增加樣品在試劑體積中的比率而擴大靈敏度（microBradfordassay:1~25ug/mL)。如果樣品與染料的比
蛋白質定量檢測方法——凱氏定氮法
凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下，用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽，然后在堿性條件下將銨鹽轉化為氨，隨水蒸氣蒸餾出來并為過量的硼酸液吸收，再以標準鹽酸滴定，就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質含氮量比較恒定，可由其氮量計算蛋白質含量，故此法是經典的蛋白質定
蛋白質定量檢測方法——考馬斯亮藍法
考馬斯亮藍顯色法的基本原理是根據蛋白質可與考馬斯亮藍G-250 定量結合。當考馬斯亮藍 G-250 與蛋白質結合后，其對可見光的最大吸收峰從 465nm 變為 595nm。在考馬斯亮藍 G-250 過量且濃度恒定的情況下，當溶液中的蛋白質濃度不同時，就會有不同量的考馬斯亮藍 G-250 從吸收峰為
上海藥物所靶標發現技術取得突破
中科院上海藥物所蔣華良研究員與大連理工大學力學系王希誠教授合作，針對尋找藥物作用新靶標的需求，帶領博士后李洪林和高振霆等，發展了以活性小分子為探針、搜尋潛在結合蛋白質的“反向分子對接”方法，相關結果發表在Nucl. Acids Res. (2006, 34, W219-224)，并建立了相應的公共網
內含肽可作為治療線粒體疾病藥物靶標
粒體DNA(mtDNA)突變，將導致mtDNA編碼、與氧化磷酸化有關的13種蛋白質的突變，從而起很多罕見的疾病，這也可能是人類衰老的原因之一。由于該13種蛋白質高度的疏水性，通過轉基編碼表達的有生物活性的蛋白質很難從細胞質中進入線粒體。根據內含肽的作用機制，首先在胞質合成線粒體目標蛋白前體片段序
蛋白質定量檢測方法——膠體金測定法
膠體金(colloidal gold)是氯金酸(chloroauric acid)的水溶膠，呈洋紅色，具有高電子密度，并能與多種生物大分子結合。 膠體金是一種帶負電荷的疏水膠體遇蛋白質轉變為藍色，顏色的改變與蛋白質有定量關系，可用于蛋白質的定量測定。
上海藥物所發現戊二酸尿癥潛在藥物靶標
記者從中科院上海藥物所獲悉，該所化學蛋白質組學研究中心科研人員首次發現了與遺傳代謝性疾病戊二酸尿癥相關的體內蛋白修飾新型通路——賴氨酸戊二酰化，并發現了治療此疾病的潛在新藥物靶標。相關研究論文日前已發表于《細胞·代謝》。 近年來，代謝性疾病患病率逐漸增高，嚴重影響了人們的生活質量。據統計，
蛋白質定量常用方法
1.基于蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使用的酚試劑比色法 由于各種蛋白質分子中上述兩種氨基酸的組成比例不同，特別是白蛋白含色氨酸為0.2%，而γ-球蛋白中含量達2%-3%，導致較大的差異。Lowry的改良法在酚試劑中加入Cu2+，集中原法和雙縮脲反應兩者的作用，使呈色靈敏度提高。其中75%的呈色依
蛋白質定量技術――iTRAQ
摘要：同位素標記相對和絕對定量（iTRAQ）技術是近年來最新開發的一種新的蛋白質組學定量研究技術，具有較好的定量效果、較高的重復性，并可對多達四種不同樣本同時進行定量分析。研究人員采用iTRAQ蛋白質定量技術加速蛋白質的定量研究，當然這門新興的工具仍然需要進一步的完善。??? 僅僅知道蛋白質的身
蛋白質定量實驗步驟
?(1) 準備 100~1500 ug/ml 的標準品, 溶于 Bradford 法相兼容緩沖液中。對于較稀的樣品，可能通過增加樣品在試劑體積中的比率而擴大靈敏度（microBradfordassay:1~25ug/mL)。如果樣品與染料的比值太高, 可能會增加反應混合物的 PH 而導致反應背景較高
蛋白質定量常用方法
1.基于蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使用的酚試劑比色法 由于各種蛋白質分子中上述兩種氨基酸的組成比例不同，特別是白蛋白含色氨酸為0.2%，而γ-球蛋白中含量達2%-3%，導致較大的差異。Lowry的改良法在酚試劑中加入Cu2+，集中原法和雙縮脲反應兩者的作用，使呈色靈敏度提高。其中75%的呈色依賴
新的抗癌藥物靶標——脂質化學信使
一半以上的人類癌癥都具有脂質代謝化學信號異常上調，但這些信號在腫瘤形成過程中是如何被調控的仍沒有得到充分的理解。 近日，賓夕法尼亞大學Youhai Chen博士等人發現：TIPE3（一種新近被新發現的致癌蛋白），通過靶向這些脂質信號途徑促進癌癥。 第二信使--脂質在細胞膜外信號到細胞內部的傳
我所發展高效藥物靶標鑒定新方法
原文地址：http://www.dicp.cas.cn/xwdt/kyjz/202210/t20221024_6538609.html 近日，我所生物分離分析新材料與技術研究組（1809組）葉明亮研究員團隊和吉林大學胡良海教授團隊、我所分子模擬與設計研究組（1106組）李國輝研究員團隊合作，利用蛋
葉明亮：發展高效藥物靶標鑒定新方法
近日，大連化物所生物分離分析新材料與技術研究組（1809組）葉明亮研究員團隊和吉林大學胡良海教授團隊、我所分子模擬與設計研究組（1106組）李國輝研究員團隊合作，利用蛋白質結合藥物以后對變性引起的沉淀具有更高的耐受性原理，發展了一種新型的藥物靶標蛋白質鑒定方法。 靶標蛋白的發現對藥物作用機制的