心肌細胞流式檢測AV／PI個人經驗
原代培養細胞，關鍵是消化，我一般酶液是新配的，要足量啊（又一次還剩三排的時候，一同學把酶液碰到水浴鍋，害的我借得酶液，耽誤了時間，而且組間數據紊亂，最后浪費細胞和染料，大家要注意保護好酶液啊），這樣每次心理都有底，而且放入水浴37度30min，甚至扔到培養箱（不建議采用）升溫。消化前，用溫PBS輕洗細胞，一次，然后開始消化，24孔板加400ul酶液（0.25%胰酶和0.02%edta，如果你的edta不好，那么配好就用0.22或0.45um膜過濾），先鏡下觀察，放入培養箱10s，后再看，一般夠了，不過正常組可能需要20-30s。然后我就輕拍手，幫助消化，鏡下看細胞，飄起70%-80%，每孔加10%FBS培養基終止消化，輕吹打，孔四周和中間（俺的細胞就是中間多）。吸入流式管。離心1000轉7min，其實要根據離心機質量來考慮，如果進口的就用這個設置，國產的啟動和降速太慢，而且轉速不確定。小心果斷干脆快速的倒上清，加已經按1：4稀釋......閱讀全文
心肌細胞流式檢測AV/PI個人經驗
原代培養細胞，關鍵是消化，我一般酶液是新配的，要足量啊（又一次還剩三排的時候，一同學把酶液碰到水浴鍋，害的我借得酶液，耽誤了時間，而且組間數據紊亂，最后浪費細胞和染料，大家要注意保護好酶液啊），這樣每次心理都有底，而且放入水浴37度30min，甚至扔到培養箱（不建議采用）升溫。消化前，用溫PBS輕洗
siRNA個人經驗小結
在活體RNAi關鍵點：類似藥物屬性的引入，如穩定性、細胞內的傳送、組織的生物可溶性進入合成的siRNA。授予siRNA類似藥物的屬性化學穩定性的膽固醇共聚的siRNA 顯著的改善了其在體內和體外的藥物屬性。化學穩定性增強的方法：對正義和反義鏈進行部分的phosporothioate backbone
western－blotting的一些個人經驗
個人經驗,僅供參考:1.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.推薦使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產的奶粉的顆粒比較大,不太容易溶解.2.關于三名治:本人以前做時花很多時間在防止短路上,現在我做的時候根本沒有剪齊,最主要的是趕氣泡,這是關鍵
SDSPAGE的個人經驗總結
前些日子做SDSPAGE，做了兩天，犯了一大堆錯誤，寫出來供大家借鑒：1。聽有人說瓊脂粉可以做封底膠，一試，漏了，還是用瓊脂糖吧。2 AP用別人舊的，結果膠不干?3 A液，B液用舊的，不干。結論：不要用別人的，一定要自已配，別怕浪費。4 前后Tris 的PH值搞錯，結果不凝5 電泳時長板接負極，反了
流式細胞儀檢測細胞凋亡：PI單染色法
一、基本原理其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性，主要包括以下幾個方面：1、細胞核的改變由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染性發生改變
流式細胞儀檢測細胞凋亡——Heochst－33342/PI雙染色
基本原理 經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞，而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色，且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據
流式細胞儀檢測細胞凋亡：PI單染色法
一、基本原理其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性，主要包括以下幾個方面：1、細胞核的改變由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染性發生改變
流式細胞儀檢測細胞凋亡――PI單染色法
基本原理其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性，主要包括以下幾個方面：細胞核的改變：由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染性發生改變。研究
流式細胞儀檢測細胞凋亡：PI單染色法
一、基本原理其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變zui具特征性，主要包括以下幾個方面：1、細胞核的改變由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染性發生
流式細胞儀檢測細胞凋亡——PI單染色法
基本原理 其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性，主要包括以下幾個方面：1. 細胞核的改變：由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染性發生
流式細胞儀檢測細胞凋亡——PI單染色法
基本原理其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性，主要包括以下幾個方面：1. 細胞核的改變：由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染性發生改變
流式細胞儀檢測細胞凋亡——PI單染色法
基本原理 其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性，主要包括以下幾個方面：1. 細胞核的改變：由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染性發生
流式細胞計PI染色死細胞
PI能夠插入雙鏈DNA中。它被活細胞排斥但能穿透正在死亡或已經死亡的細胞的細胞膜。Ⅰ、材料1、PI（e.g.,Cat #537059,Calbiochem,San Diego,CA）2、緩沖體系：1×PBS(Ca2+ and Mg2+ free,e.g.,Cat#9240,Irvine Scient
流式細胞計PI染色死細胞
PI能夠插入雙鏈DNA中。它被活細胞排斥但能穿透正在死亡或已經死亡的細胞的細胞膜。Ⅰ、材料1、PI（e.g.,Cat #537059,Calbiochem,San Diego,CA）2、緩沖體系：1×PBS(Ca2+ and Mg2+ free,e.g.,Cat#9240,Irvine Scient
流式細胞儀檢測細胞凋亡方法(Annexin－V－法)
實驗概要Annexin V是一種檢測細胞凋亡的試劑，本實驗介紹了一個用流式細胞儀檢測細胞凋亡的方法(Annexin V 法)。實驗原理Annexin V是檢測細胞凋亡的靈敏指標之一。它是一種磷脂結合蛋白，可以與早期凋亡細胞的胞膜結合，而細胞質膜的改變是細胞發生凋亡時最早的改變之一。在細胞發生凋亡
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗PI單染色法
一、基本原理其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性，主要包括以下幾個方面：1、細胞核的改變由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染性發生改變
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗——PI單染色法
實驗方法原理主要根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變，包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等進行檢測。實驗材料細胞試劑、試劑盒PBSPI蒸餾水乙醇儀器、耗材棕色瓶400目篩網流式細胞儀實驗步驟一、收集細胞收集細胞｛數目約（1~ 5）x106個/mL｝
做血常規半年之個人經驗談（二）
事情太多了，再說就有點賣弄的味道了，還是談談自己對檢驗的看法。1，檢驗最重要的是要靈活。檢驗的基礎是準，做不準，我們就沒有與臨床對話的資本，做得不準，談什么都沒有意義了，但是大家不要始終在一個準字上下工夫，檢驗的核心應該是活，靈活。這個社會什么都要活，用時髦點的語言來講，就是不要照抄照搬，不要教條主
做血常規半年之個人經驗談（一）
終于再一次鼓起勇氣談經驗,檢驗版的高手總習慣潛水.作為一個后輩,在此談自己的經驗,談自己對檢驗的淺薄認識,或多或少有些買弄的味道,顯露出自己不謙虛的一面.好了,廢話少說,買弄正式開始,先談一下我們的工作情況:儀器是SE9500，全自動的,每天上午120個左右,最多180個,全部我一個人做,還要每天下
橈骨遠端骨折手法復位小夾板固定個人經驗
橈骨遠端定義是腕關節近側2-3cm以遠部位發生的骨折。橈骨遠端骨折是人體常見的骨折部位，約占四肢骨折的18%左右，多見于老年人。多為摔倒后手掌撐地導致。橈骨遠端骨折分為克雷氏骨折（colles骨折）、史密斯骨折（smith骨折）和巴通骨折（barton骨折）。Colles骨折是骨折遠端向背側和橈側移
關于全血的保存DNA提取pcr個人經驗
做了好多DNA提取保存，吃了很多虧給大家點建議吧：（有疑問可以回帖，有時間我會回答如果我知道）。 血液保存： EDTA抗凝最好，肝素也可以不過經常會影響后續試驗，一般可以保存在-20和-80保存3-5年沒有問題——保存時間越長似乎dna提取越少，再長時間我也沒有試過，注意解凍一次大概損失20%左右（
流式細胞儀檢測細胞凋亡方法(Annexin－V－法)
實驗原理?Annexin V是檢測細胞凋亡的靈敏指標之一。它是一種磷脂結合蛋白，可以與早期凋亡細胞的胞膜結合，而細胞質膜的改變是細胞發生凋亡時最早的改變之一。在細胞發生凋亡時，膜磷脂酰絲氨酸(PS)由質膜內側翻向外側。Annexin V與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，因而與細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸結合
流式細胞儀檢測細胞凋亡方法（Annexin－V－法）
實驗原理Annexin V是檢測細胞凋亡的靈敏指標之一。它是一種磷脂結合蛋白，可以與早期凋亡細胞的胞膜結合，而細胞質膜的改變是細胞發生凋亡時早的改變之一。在細胞發生凋亡時，膜磷脂酰絲氨酸(PS)由質膜內側翻向外側。Annexin V與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，因而與細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸結合。由
流式細胞儀檢測細胞凋亡――Annexin－V/PI雙染色法
基本原理細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面，目前早期識別仍有困難。這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸（PS）從細胞膜內轉移到細胞膜外，使PS暴露在細胞膜外表面。PS是一種帶負電荷的磷脂，正常主要存在于細胞膜的內面，在細胞發生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS暴露在細胞膜外。Ann
利用PI單染色法進行流式細胞儀檢測細胞凋亡
一、基本原理流式細胞儀檢測細胞凋亡：PI單染色法其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變zui具特征性，主要包括以下幾個方面：1、細胞核的改變由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色
流式細胞儀檢測細胞凋亡：Annexin－V/PI雙染色法
一、基本原理細胞凋亡早期改變發生在細胞膜表面，目前早期識別仍有困難。這些細胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸（PS）從細胞膜內轉移到細胞膜外，使PS暴露在細胞膜外表面。PS是一種帶負電荷的磷脂，正常主要存在于細胞膜的內面，在細胞發生凋亡時細胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS暴露在細胞膜外。A
細胞周期的流式細胞伩檢測實驗方法（PI，Brdu)2
B.3. COMMENTARY?B.3.1 Background information?The critical steps in the methodology are cell fixation, permeabilization and the concentrations of anti-
流式細胞儀之細胞凋亡檢測的PI雙染色法
流式細胞儀是檢測懸浮的單細胞或微粒的信號分析技術，被譽為實驗室的“CT”，可用于細胞凋亡檢測?、細胞分選、單細胞內細胞因子表達分析等。這里簡單介紹下流式細胞儀檢測細胞凋亡的兩種方法。第一部分?流式細胞儀?檢測細胞凋亡:Heochst 33342/PI雙染色法一、基本原理經固定的凋亡細胞其染色體熒光染
細胞周期的流式細胞伩檢測實驗方法（PI，Brdu)1
ANALYSIS OF CELL CYCLE?Miriam Capri and Daniela Barbieri?Dept. Biomedical Sciences, Sect. General Pathology,Via Campi, 287, University of Modena, 4110
流式細胞儀檢測細胞凋亡——Heochst－33342/PI雙染色法
基本原理 經固定的凋亡細胞其染色體熒光染料的DNA可染性性下降。細胞一經固定就不再是活細胞，而且細胞固定過程對細胞膜的通透性也有影響。因此發展了用“細胞活性”鑒定染料染色的流式細胞儀檢測方法。這些方法細胞不經固定就直接用DNA染料染色，且染料的濃度要比固定細胞所用的濃度要低得多。流式細胞儀通常根據