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  • 細胞培養大攻略4

    10、為什么培養基中可以省去加酚紅? 酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養基。 11、如何用臺盼蘭計數活細胞? 用無血清培養基把細胞懸液稀釋到200-2 000個/毫升,在0.1毫升的細胞中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數分鐘后,用血球計數板計數細胞。活細胞排斥臺盼蘭,因而染成藍色的細胞是死細胞。 12、如何消除組織培養的污染? 當重要的培養污染時,研究者可能試圖消除或控制污染。首先,確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母,把污染細胞與其它細胞系隔離開,用實驗室消毒劑消毒培養器皿和超凈臺,檢查H......閱讀全文

    細胞培養大攻略4

    10、為什么培養基中可以省去加酚紅?? ?酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不

    細胞培養大攻略

    一、細胞培養基礎和步驟細胞培養基大全細胞原代培養步驟細胞傳代培養步驟二、細胞培養常見問答1、加到培養基中的血清?必須滅活嗎?答:不是必須的,看做什么實驗了。2、四季青胎牛血清滅活是56 ℃30分鐘嗎?答:如果用于培養大多數的腫瘤細胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子?。但是如

    細胞培養大攻略8

    79、細胞傳代消化時所用胰酶濃度越高越好嗎??不見得!因為胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、溫度、胰酶濃度及溶液中是否含有Ca++, Mg++離子和血清等因素有關。通常情況下,pH 8.0 , 溫度 37℃其作用能力最強。另外,鈣、鎂離子及血清均能大大降低其消化能力。我們每次進行傳代消化前,一定

    細胞培養大攻略5

    24、昆蟲細胞培養的最適PH值和滲透壓是多少?? ?生長培養基的PH值對細胞的增值和病毒或重組蛋白的生產均會產生影響。對于大部分鱗翅類昆蟲細胞系,在PH值 6.0-6.4范圍的大部分應用效果良好。培養鱗翅類昆蟲細胞系時,培養基的最適滲透壓是 345-380 mOsm/kg.。為保證可靠和持久的細胞培

    細胞培養大攻略6

    44、細胞冷凍管解凍培養時, 是否應馬上去除DMSO??除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15 ml新鮮培養基之培養角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。?

    細胞培養大攻略7

    62、貯存在冰箱中的瓶口已開的培養基,在放置幾天后顏色變紫??這主要是由于在暴露到周圍的CO2水平時,碳酸氫納導致了pH值的上升。您可以在使用前松開瓶口,在CO2培養箱孵育培養基10-15分鐘,來校正溶液的pH值(確定松開瓶口以保證氣體交換)。?63、 細胞培養基偶然被凍,可否繼續使用??如果細胞培

    細胞培養大攻略3

    70、?血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理?血清中沉淀物的出現有許多種原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。?若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清

    細胞培養大攻略2

    26、PFHM-II 和HYBRIDOMA-SFM之間有什么差別? PFHM-II (Protein-free Hybridoma Medium)是不包含有蛋白質的單克隆抗體生產培養基。如果作為雜交瘤生產培養基使用,PFHM-II可能需要補充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM即是雜交瘤生產培養

    細胞培養大攻略9

    85、培養液出現沉淀,但pH值不變?可能原因?(1)洗滌劑清洗后殘留有磷酸鹽,將培養基成分沉淀下來。?(2)冰凍保存培養液。?建議解決方法?(1)用去離子水反復沖洗玻璃器皿,然后滅菌。?(2)將培養液加熱到37℃,搖動使其溶解如沉淀仍然存在,丟棄培養液。?86、培養液出現沉淀, 同時pH 發生變化?

    PCR技術大攻略

    一、PCR技術及步驟聚合酶鏈式反應(PCR)PCR擴增產物的克隆上述兩個實驗包含基本原理、步驟、問題等。二、PCR常見問題匯總1. 沒有得到擴增產物?(1)酶失活或在反應體系中未加入酶。Taq?DNA聚合酶因保存或運輸不當而失活,往往通過更換新酶或用另一來源的酶以獲得滿意的結果。?(2)模板含有雜質

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    細胞培養攻略:細節決定成敗

    培養細胞就像養育BABY一樣,要精心照料,用心呵護。-好每天都去看看它們,滿足它們所需要的物質需求,防止出現培養箱缺水、二氧化碳不足、溫度不夠等各種小意外,還要注意很多小細節,以免開展重復的實驗導致不必要的人力物力浪費。?那培養細胞都要注意哪些小細節呢?就讓我們一起來看看吧!?1.細胞生長的營養來源

    細胞培養技術4

    貼壁因子使用方法:①選擇適宜的貼壁因子。②將貼壁因子貯存液用三蒸水或PBS液或D-Hanks液稀釋成0.1毫克/毫升的工作液。③濾過除菌的工作液按50微升/平方厘米涂布培養器皿的細胞生長面。④室溫靜置5分鐘(膠原基質延長24小時)。⑤除去多余溶液。⑥涂布面用滅菌三蒸水洗滌后,再經細胞培養基浸泡過渡,

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    背景:在生物制藥行業,細胞培養操作在確定整個生產過程中起著至關重要的作用。在過去幾十年中,該行業在從補料分批培養中獲得更高的產品效價方面取得了很大的進展。細胞生產的蛋白質類產品的產量都已達克級有的甚至可達10克級,比80年代中期提高了100多倍,用于治療各種疾病的生物產品的種類也越來越多,這些成果的

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    ?動脈平滑肌細胞培養的幾個問題組織塊大小邊緣密度翻面時間觀察時間對原代細胞萌發的影響對于貼塊法的原代培養來源,由于細胞并非直接獲得,而是從組織塊邊緣長出,其中有一“突破過程”,且細胞萌發后尚需一定的細胞密度才能使其存活、增殖,故組織塊大小、邊緣、密度均影響細胞萌出與否及細胞存活、增殖。公認的方法是將

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