雙重染色抗體的選擇
用未偶聯一抗進行細胞培養物或組織切片的雙重免疫染色要求一抗來源于不同物種并且二抗分別識別其中之一，二抗說明書應描述其與其它物種來源的免疫球蛋有否有交叉吸附。......閱讀全文
雙重染色抗體的選擇
用未偶聯一抗進行細胞培養物或組織切片的雙重免疫染色要求一抗來源于不同物種并且二抗分別識別其中之一，二抗說明書應描述其與其它物種來源的免疫球蛋有否有交叉吸附。
吖啶橙和溴化乙啶雙重染色
染料同時染色細胞，為鑒別凋亡細胞和壞死細胞提供較好的方法。染料： 吖啶橙(AO)膜通透性較高的染料?溴化乙啶(EB）正常細胞： AO－ 綠色熒光強，EB－ 染色紅色熒光較弱；凋亡細胞： AO－ 綠色熒光強度弱減，EB－ 染色紅色熒光加強；壞死細胞： AO－ 綠色熒光強度弱或消失，EB－ 染色紅色熒光
免疫組化試驗抗體選擇及常用染色方法
一、免疫組織化學(Immunohistochemistry,IHC)免疫組織化學是利用抗原抗體的特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質)，對其進行定位、定性及定量的研究。免疫組織化學染色技術不僅有較高的敏感性
雙酶雙底物的雙重免疫染色—多種組織抗原配對的雙重酶
改良的 EnVision-HRP/AP 雙酶雙底物的雙重免疫染色（間接法）——Ki-67-CK20 等多種組織抗原配對的雙重酶實驗步驟1. 恒冷切片或石蠟切片，厚 4～6 μm，常規處理。2. 0.1％NaN3+0.3％H2O2/TBS（50 mmol/L，pH 7.8）或 0.3％H2O2/甲醇，
雙重染色法免疫熒光組織化學染色步驟
1．一步雙染色法先將兩種熒光標{己抗體按適當比例混合(A+B)，按直接法進行染色。2．二步雙染色法先用TRITC標記的A抗體進行免疫熒光染色，再用FITC標記的B抗體染色，根據兩種抗體的動物種屬不同，可用直接法也可用間接法，結果A抗原呈現橘紅色熒光，而B抗原呈現黃綠色熒光。在應用中，常用的方法是免疫
雙酶雙底物的雙重免疫染色—淋巴瘤輕鏈κ、λ的雙重酶標記
實驗步驟1. 石蠟切片常規脫蠟至水（若用含汞固定液固定的組織，則需用內含 0.5％ 碘的乙醇溶液脫汞 5 min，乙醇濃度為 70％，經自來水洗后以 2.5％ 硫代硫酸鈉浸洗 1 min，水洗）。2. 0.3％H2O2 甲醇液浸泡切片 30 min，自來水洗，蒸餾水洗，入 PBS（0.01mol/L
關于抗體的選擇
對于國內的大多數實驗室來講，做western blot實驗選擇抗體是個頭疼的問題。原因很簡單，買進口抗體捉襟見肘，買國產抗體得需要大無畏的勇氣。在我們實驗室western blot實驗歷程里，我們用過進口抗體，進口抗體國內分裝包裝，國產抗體，質量良莠不齊。 進口抗體一般不會出現閃失：Abca
抗體選擇指南
抗體親和層析原理是蛋白 A和蛋白 G對不同來源的IgG的Fc-區具有高度親和性和特異性。這些蛋白被固定在我們的許多填料上，產生了從腹水、細胞培養上清液和血清中分離IgG和IgG亞類的極好方法。關于抗體親和純化的全部產品系列，見下頁抗體親和填料和層析柱選購指南。???? 蛋白A (Protein
流式抗體選擇
很多朋友面對各種各樣顏色的流式抗體，在選擇及搭配上就犯了難，在此我們需要了解下流式細胞儀的各個激發光及各個接收通道是如何工作的、常見的熒光素有哪些、這些熒光的特性是什么樣的。了解了這些，選擇抗體和搭配不同的顏色就變得非常簡單了。我們再回過頭來看看流式細胞儀的原理，熟悉一下流式細胞儀的光路系統。從這張
抗體的選擇和保存
當我們要檢測目的蛋白在組織中表達情況的時候，如何選擇適合我們實驗需要的抗體，并恰當保存使用，是每個科研人員需要細心考慮的。抗體種類繁多，品牌眾?多，技術參數不一，價格和質量更是相差甚大，如何購買到高質量價格合適的抗體，并準確地做出我們想要的結果，其中有很多細節需要注意。一、怎樣選擇適合你實驗需要的抗
選擇自動雙重純水蒸餾器的重要性
儀器在可靠性、使用壽命和操作性能多方面作了改進提高。全新箱式結構，打開箱蓋不必動玻璃。高硼硅玻璃制成。石英管全浸入式加熱。雙重蒸餾、水位電子自動控制。機箱內外噴塑，耐腐蝕。特別介紹：儀器備有進水節流閥，特別適合用桶裝水飲用水做水源。優點如下：1、減少水垢、減少清洗次數、延長壽命一倍以上。2、出水水質
選擇自動雙重純水蒸餾器的重要性
儀器在可靠性、使用壽命和操作性能多方面作了改進提高。全新箱式結構，打開箱蓋不必動玻璃。高硼硅玻璃制成。石英管全浸入式加熱。雙重蒸餾、水位電子自動控制。機箱內外噴塑，耐腐蝕。特別介紹：儀器備有進水節流閥，特別適合用桶裝水飲用水做水源。優點如下：1、減少水垢、減少清洗次數、延長壽命一倍以上。2、出水水質
怎么選擇流式抗體？
我們開始流式實驗時，首先要選擇抗體，必然要涉及到熒光的選擇，盡量使這些熒光的補償值降到zui低。?1，我們需要了解我們用的流式細胞儀的硬件設施（激光，濾光片）??2，選擇合適的熒光染料，盡量利用到你的儀器上的所有激光，這樣可以使這些熒光交叉可能性達到zui小。一般四種顏色或以下的比較好選，常用：FI
怎么選擇流式抗體
我們開始流式實驗時，首先要選擇抗體，必然要涉及到熒光的選擇，盡量使這些熒光的補償值降到zui低。?1，我們需要了解我們用的流式細胞儀的硬件設施（激光，濾光片）??2，選擇合適的熒光染料，盡量利用到你的儀器上的所有激光，這樣可以使這些熒光交叉可能性達到zui小。一般四種顏色或以下的比較好選，常用：FI
怎么選擇流式抗體？
我們開始流式實驗時，首先要選擇抗體，必然要涉及到熒光的選擇，盡量使這些熒光的補償值降到zui低。?1，我們需要了解我們用的流式細胞儀的硬件設施（激光，濾光片）??2，選擇合適的熒光染料，盡量利用到你的儀器上的所有激光，這樣可以使這些熒光交叉可能性達到zui小。一般四種顏色或以下的比較好選，常用：FI
流式細胞儀多色染色與同型對照抗體選擇與搭配
一、如何搭配流式抗體熒光標記流式抗體熒光標記搭配主要由3個因素決定的：流式細胞儀能檢測多少個通道需要同時檢測檢測多少個指標廠家的抗體有多少種熒光標記如果流式細胞儀的通道越多，那么同一份樣本能同時做的表面/胞內標志就越多A 、 如何根據流式細胞儀搭配流式抗體1） BD流式細胞儀（06版目錄第614頁）
雙重熒光定量PCR探針熒光基團該怎么選擇
有干擾的話，在儀器上面就可以看出來，比如說，FAM和VIC，FAM有信號，單獨看VIC也肯定有信號，只是低點而已
流式抗體（熒光抗體）細胞染色步驟與注意
染色緩沖液（BSA）的配制：PBS含有1% FBS和0.09% NaN3，置于冰上或4度冰箱備用。準備單細胞懸液：淋巴組織、骨髓、血液或培養的細胞。用冰染色緩沖液洗細胞2次，離心細胞，用冰染色緩沖液重懸細胞，使終濃度為2×107細胞/ml。各取50ul（106細胞）細胞懸液到2個圓底的Ep管中。根據
Ig分子具有結合抗原和刺激抗體生成的雙重功能
Ig分子具有結合抗原和刺激抗體生成的雙重功能。首先，它能與抗原結合，產生多種生物效應，包括： ①與病原微生物或它分泌的毒素結合，產生抗感染免疫； ②活化體液的一類正常組分，即補體分子，起到殺傷病原體或靶細胞的作用； ③加強吞噬細胞等免疫細胞的吞噬或殺傷效應； ④與組織中的肥大細胞或嗜堿性
如何選擇合適的GST抗體？
GST標簽系統具有蛋白表達產率高、表達產物純化方便，以及利于GST抗體制備等特點和優勢。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細菌裂解液中提取，在不變性的條件下通過親和層析得到，也可以直接被位點特異性蛋白酶裂解去除。正是由于以上的優點，商品化的GST融合蛋白表達體系以及GST標簽抗體系統至今仍被廣泛應用
如何選擇合適的GST抗體？
GST標簽系統具有蛋白表達產率高、表達產物純化方便，以及利于GST抗體制備等特點和優勢。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細菌裂解液中提取，在不變性的條件下通過親和層析得到，也可以直接被位點特異性蛋白酶裂解去除。正是由于以上的優點，商品化的GST融合蛋白表達體系以及GST標簽抗體系統至今仍被廣泛
如何選擇合適的GST抗體？
GST標簽系統具有蛋白表達產率高、表達產物純化方便，以及利于GST抗體制備等特點和優勢。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細菌裂解液中提取，在不變性的條件下通過親和層析得到，也可以直接被位點特異性蛋白酶裂解去除。正是由于以上的優點，商品化的GST融合蛋白表達體系以及GST標簽抗體系統至今仍被廣泛
Western－Blot中抗體的選擇
Western Blot又稱為蛋白質印跡，是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的基于抗體抗原之間特異免疫反應的一種定量或定性檢測蛋白的實驗方法。基本原理：聚丙烯酰胺凝膠電泳將不同分子量的蛋白質樣品分離，分離后的蛋白被轉移到固相支撐物（雜交膜）上，抗體特異性識別目標蛋白，通過酶促反應或者化學發光等
免疫組化抗體選擇要點及流式抗體選擇常識
一抗的選擇要點1.選擇單克隆還是多克隆抗體？由一種B細胞產生的單一特異性抗體叫做單克隆抗體，單克隆抗體能目標明確地與單一特異抗原決定簇結合，就像導彈精確地命中目標一樣。另一方面，即使是同一個抗原決定簇，在機體內也可以由好幾種B細胞產生抗體，形成抗體混雜物，稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應中，一般單克隆
熒光抗體染色與結果判斷
熒光抗體與抗原反應，一般在25～37℃，30分鐘，不耐熱抗原的檢測則以4℃過夜為宜。(一)直接法：用特異熒光抗體直接滴加于標本上。本法操作簡便，特異性高，非特異熒光染色因素少；缺點是敏感度偏低，需制備特異性的熒光抗體。(二)間接法：可用于檢測抗原和抗體，普通一抗+熒光二抗。靈敏度高，僅需一種熒光抗體
HA抗體推薦—選擇合適HA標簽抗體的因素
HA標簽系統利用一個HA (流感病毒血凝素，influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目標蛋白。HA標簽可位于蛋白質的C端或N端，該系統已廣泛應用于多種細胞類型，相應的HA標簽抗體也被廣泛應用。HA 標簽抗體能特異識別C末端或N末端帶有HA標簽
GAPDH抗體推薦—Abbkine高性價比GAPDH內參抗體的選擇
在Western Bloting實驗中，可能存在總蛋白濃度測定不準確，或者蛋白質樣品在電泳前上樣時產生的樣品間的操作誤差；這些誤差可以通過測定每個樣品中實際轉到膜上的內參，比如內參GAPDH的含量來進行校正。GAPDH（甘油醛-3-磷酸脫氫酶）是參與糖酵解的一種關鍵酶，由4個30-40kDa的亞基組
如何選擇合適的Myc標簽抗體？
隨著蛋白質組學的迅猛發展，重組蛋白質的使用在近年來大大增加。重組雜合體含有一個親和標簽如GST、Myc、His等，可用于輔助目標蛋白的純化，這已經被廣泛使用。利用融合蛋白有助于重組蛋白純化和檢測的這個有點被廣泛認可。Myc標簽相當于人的c-Myc 410-419位肽段（序列為：EQKLISEED
如何選擇合適的MBP標簽抗體？
大腸桿菌麥芽糖結合蛋白（ Maltose Binding Protein，MBP）來源于大腸桿菌malE基因編碼的蛋白，是細菌麥芽糖轉運系統的成員之一，主要負責麥芽糖的攝取及分解代謝。malE基因產物能與多種蛋白融合，是進行表達研究的有效媒介，由于MBP融合蛋白原核表達載體具有表達效率高，易于純
如何選擇合適的CBP標簽抗體？
CBP標記的蛋白在低濃度鈣緩沖液中能夠異性的被鈣調蛋白樹脂捕捉吸附，并且在中性環境中能夠被2 mM EGTA洗脫，這與6組氨酸親合標簽純化體系相比反應條件要溫和許多。僅有4-kDa 大小的CBP tag 與26-kDa GST 標簽相比對蛋白分子的影響非常小。在所表達的蛋白分子上包含一個凝血