可溶性抗原的制備及鑒定1
蛋白質、糖蛋白、脂蛋白、酶類、補體、脂多糖、細菌外毒素和核酸等均為可溶性抗原,它們有相當部分來源于組織和細胞,成分復雜。制備這類免疫原時,首先須將組織和細胞破碎,然后再從組織和細胞勻漿中提取目的蛋白或其他抗原,提純的抗原需鑒定后才能用做免疫原。 一、組織勻漿的制備 用于制備免疫原的材料必須是新鮮或低溫保存的。材料獲得后立即去除包膜或結締組織,臟器應進行灌洗,去除血管內殘留的血液,用含0.5g/L NaN3的生理鹽水洗去血跡及污物;在4℃水浴或冰浴中將洗凈的組織剪成0.3~0.5cm3小塊,加入適量生理鹽水,裝入搗碎機筒內制成組織勻漿。組織勻漿經3000r/min離心10min后,上清液作為提取可溶性抗原的材料。上清液在提取前還必須進行離心去除細胞碎片及微小的組織。 二、細胞破碎 提取細胞的可溶性抗原,需將細胞破碎。根據細胞類型不同,選擇破碎的方法也有一定的差異,現介紹幾種常用的細胞破碎......閱讀全文
關于可溶性抗原的基本介紹
在病毒的抗原抗體反應中,并不是整個的病毒粒子,而是有更小的粒子的抗原參與反應,這種更小的粒子的抗原稱為可溶性抗原。例如流行性感冒感染時,細胞中可出現10納米大小的可溶性抗原。可溶性抗原雖然是在感染過程中于細胞內產生的,但是在病毒粒子的組分中有時也包含它。
簡述可溶性抗原的基本作用
可溶性抗原(solubleantigen)存在于宿主組織或體液中游離的抗原物質。它們可能是寄生蟲的代謝產物;或死亡蟲體釋放的體內物質;或由于寄生生活所改變的宿主物質。可溶性抗原在抗寄生方面,感染的病理學方面以及寄生蟲的免疫逃避上起重要作用。 可溶性抗原是最易誘導免疫耐受的抗原。
可溶性抗原的提純和純化
1.?超速離心法:適用于少數大分子抗原或比重較輕的抗原,不適用于大多數中小分子抗原。2.?選擇性沉淀法:(1)核酸去除法:核糖核酸降解法更簡便。(2)鹽析法:常采用硫酸銨使蛋白抗原進行粗篩、提取丙種球蛋白及抗原濃縮。(3)有機溶劑沉淀法:常采用乙醇或丙酮。(4)聚合物沉淀法:常用非離子型聚合物,如聚
可溶性抗原的制備及鑒定2
1、超速離心法?此法分離和純化抗原的原理是利用各顆粒在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的顆粒處于不同密度梯度層內,達到彼此分離的目的。常用的密度梯度介質有蔗糖、甘油、CsCl等。?用超速離心或梯度密度離心分離和純化抗原時,除個別成分外,極難將某一抗原成分分離出來,故只用于少數大分子抗原的分
可溶性抗原的制備及鑒定1
蛋白質、糖蛋白、脂蛋白、酶類、補體、脂多糖、細菌外毒素和核酸等均為可溶性抗原,它們有相當部分來源于組織和細胞,成分復雜。制備這類免疫原時,首先須將組織和細胞破碎,然后再從組織和細胞勻漿中提取目的蛋白或其他抗原,提純的抗原需鑒定后才能用做免疫原。?一、組織勻漿的制備?用于制備免疫原的材料必須是新鮮或低
親和層析實驗_可溶性抗原或膜結合抗原的分離
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒TrisTSA裂解緩沖液脫氧膽酸鈉洗滌緩沖液三乙醇氨緩沖液儀器、耗材層析柱離心管離心機實驗步驟1. ?準備一支活化后被淬滅的Sepharose預柱(5 ml 柱床)和一支Ab-Spharose免疫親和層析柱,并將它們串聯起來。2. ?以冰冷TSA溶液重懸50 g 細胞至1~
可溶性抗原的提純和純化是什么?
1. 超速離心法:適用于少數大分子抗原或比重較輕的抗原,不適用于大多數中小分子抗原。 2. 選擇性沉淀法: (1)核酸去除法:核糖核酸降解法更簡便。 (2)鹽析法:常采用硫酸銨使蛋白抗原進行粗篩、提取丙種球蛋白及抗原濃縮。 (3)有機溶劑沉淀法:常采用乙醇或丙酮。 (4)聚合物沉淀法:
可溶性抗原的提純和純化是什么?
1. 超速離心法:適用于少數大分子抗原或比重較輕的抗原,不適用于大多數中小分子抗原。 2. 選擇性沉淀法: (1)核酸去除法:核糖核酸降解法更簡便。 (2)鹽析法:常采用硫酸銨使蛋白抗原進行粗篩、提取丙種球蛋白及抗原濃縮。 (3)有機溶劑沉淀法:常采用乙醇或丙酮。 (4)聚合物沉淀法:
關于抗可溶性肝抗原抗體的簡介
抗可溶性肝抗原抗體(抗-SLA抗體)是自身免疫性肝炎(AIH)的自身抗體,其靶抗原是相對分子量為50 000的一種細胞溶質分子,被稱為UGA抑制物tRNA相關蛋白。抗-SLA抗體僅在AIH及AIH與原發性膽汁性肝硬化(PBC)的重疊綜合征患者檢測陽性,在病毒性肝炎和其他肝病檢測陰性,故對AIH具
可溶性抗原(soluble-antigen)的制備及鑒定
蛋白質、糖蛋白、脂蛋白、酶類、補體、脂多糖、細菌外毒素和核酸等均為可溶性抗原,它們有相當部分來源于組織和細胞,成分復雜。制備這類免疫原時,首先須將組織和細胞破碎,然后再從組織和細胞勻漿中提取目的蛋白或其他抗原,提純的抗原需鑒定后才能用做免疫原。?一、組織勻漿的制備用于制備免疫原的材料必須是新鮮或低溫
抗可溶性肝抗原抗體(sla)的介紹
抗可溶性肝抗原抗體是自身免疫性肝炎Ⅲ型的血清學標記,對于自身免疫性肝炎的診斷和鑒別診斷均具有重要價值。一般用間接免疫熒光法測定。間接免疫熒光法實驗原理是將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在濕盒中37℃保溫30min,使抗原抗
關于抗可溶性肝抗原抗體(SLA)的簡介
抗可溶性肝抗原抗體是自身免疫性肝炎Ⅲ型的血清學標記,對于自身免疫性肝炎的診斷和鑒別診斷均具有重要價值。一般用間接免疫熒光法測定。 間接免疫熒光法實驗原理:將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。 第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在濕盒中37℃保溫30min,使抗
簡述抗可溶性肝抗原抗體的適應癥
進行抗可溶性肝抗原抗體檢測的指征有: ①黃疸、發熱、皮疹、關節炎等各種全身癥狀。 ②肝功能異常:轉氨酶和膽紅素水平較高。 ③黃疸、納差、腹脹等病毒性肝炎癥狀。 ④嘔血和(或)黑便等失代償期肝硬化,肝衰竭。
免疫學抗可溶性肝抗原抗體(SLA)介紹
抗可溶性肝抗原抗體是自身免疫性肝炎Ⅲ型的血清學標記,對于自身免疫性肝炎的診斷和鑒別診斷均具有重要價值。一般用間接免疫熒光法測定。 間接免疫熒光法實驗原理:將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。 第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在濕盒中37℃保溫30min,使抗
抗可溶性肝抗原抗體(sla)抽血后注意事項
1、抽血后,需在針孔處進行局部按壓3-5分鐘,進行止血。注意:不要揉,以免造成皮下血腫。 2、按壓時間應充分。各人的凝血時間有差異,有的人需要稍長的時間方可凝血。所以當皮膚表層看似未出血就馬上停止壓迫,可能會因未完全止血,而使血液滲至皮下造成青淤。因此按壓時間長些,才能完全止血。如有出血傾向,
免疫學實驗抗可溶性肝抗原抗體(SLA)介紹
抗可溶性肝抗原抗體(SLA)介紹: 抗可溶性肝抗原抗體是自身免疫性肝炎Ⅲ型的血清學標記,對于自身免疫性肝炎的診斷和鑒別診斷均具有重要價值。一般用間接免疫熒光法測定。 間接免疫熒光法實驗原理:將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。 第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原
關于抗可溶性肝抗原抗體的臨床意義介紹
抗-SLA抗體是一種公認的為數不多的對AIH具有高度特異性的自身抗體,特異性甚至達到了100%。但其檢出陽性率率較低.抗SLA/LP在AIH中的陽性檢出率在10%~30%之間。抗-SLA僅出現在AIH以及AIH/PBC患者中。對AIH的診斷有良好的特異性。 抗-SLA抗體不但對AIH具有高度特
免疫學抗可溶性肝抗原抗體(SLA)注意事項
一、抽血前的注意事項 1、抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。 2、體檢前一天的晚八時以后,應開始禁食12小時,以免影響檢測結果。 3、抽血時應放松心情,避免因恐懼造成血管的收縮,增加采血的困難。 二、抽血后應注意 1、抽血后,需在針孔處進
抗可溶性肝抗原抗體(sla)抽血前的注意事項
1、抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。 2、體檢前一天的晚八時以后,應開始禁食12小時,以免影響檢測結果。 3、抽血時應放松心情,避免因恐懼造成血管的收縮,增加采血的困難。
抗可溶性肝抗原抗體(sla)的臨床意義是什么
陽性見于自身免疫性肝病,大約25%的自身免疫性肝炎僅該項抗體陽性。
關于抗可溶性肝抗原抗體(SLA)的注意事項介紹
一、抗可溶性肝抗原抗體(SLA)抽血前的注意事項 1、抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。 2、體檢前一天的晚八時以后,應開始禁食12小時,以免影響檢測結果。 3、抽血時應放松心情,避免因恐懼造成血管的收縮,增加采血的困難。 二、抗可溶性
臨床化學檢查方法介紹抗可溶性肝抗原抗體(SLA)介紹
抗可溶性肝抗原抗體(SLA)介紹: 抗可溶性肝抗原抗體是自身免疫性肝炎Ⅲ型的血清學標記,對于自身免疫性肝炎的診斷和鑒別診斷均具有重要價值。一般用間接免疫熒光法測定。 間接免疫熒光法實驗原理:將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。 第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本
小鼠免疫實驗_-制備免疫脾細胞:用可溶性抗原致敏
實驗材料任意品系小鼠(6~8 周)試劑、試劑盒PBS完全和不完全弗氏佐劑抗原儀器、耗材22-G 注射針頭帶塞的 3 ml 注射器雙頭帶塞的連接器無菌剪刀剃須刀片解剖刀片木制涂棒實驗步驟1. 準備等體積 PBS 含 25~100 μg 抗原和弗氏完全佐劑的乳化液(200~400 μl/鼠)。用雙頭帶塞
人可溶性白細胞抗原G(sHLAG)ELISA試劑盒
人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗人?sHLA-G?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?sHLA-G與單抗結合,加入生物素化的抗人sHLA-G,形成免疫復合物連接在板上,辣根
人可溶性白細胞抗原I(sHLAI)ELISA試劑盒
人可溶性白細胞抗原I(sHLA-I)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗人?sHLA-I?單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的?sHLA-I與單抗結合,加入生物素化的抗人sHLA-I,形成免疫復合物連接在板上,辣根
抗可溶性肝抗原抗體(sla)的注意事項及檢查過程
注意事項 一、抽血前的注意事項: 1、抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。 2、體檢前一天的晚八時以后,應開始禁食12小時,以免影響檢測結果。 3、抽血時應放松心情,避免因恐懼造成血管的收縮,增加采血的困難。 二、抽血后應注意: 1、
酶聯免疫吸附實驗——直-接-競-爭ELISA-法檢測可溶性抗原
實驗步驟直 接 競 爭ELISA 法檢測可溶性抗原該檢測方法是使用特異性抗體和毫克級純化或半純化抗原來定性或定量測定可溶性抗原的最有效的方法(圖 1.1. 2)。用抗體替換特異性的酶標抗體,就可轉為間接方法,以種屬特異性或同種型特異性酶結合物作為第三種試劑即可檢測結合的特異性抗體的量。附 加 材 料
抗可溶性肝抗原抗體(sla)的正常值及臨床意義
正常值 間接免疫熒光法陰性。 臨床意義 陽性見于自身免疫性肝病,大約25%的自身免疫性肝炎僅該項抗體陽性。
人可溶性白細胞抗原G(sHLAG)酶聯免疫分析(ELISA)
人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)含量。實驗原理:????本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)水平。用純化
抗可溶性肝抗原抗體(sla)的臨床意義及注意事項
臨床意義 陽性見于自身免疫性肝病,大約25%的自身免疫性肝炎僅該項抗體陽性。 注意事項 一、抽血前的注意事項: 1、抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。 2、體檢前一天的晚八時以后,應開始禁食12小時,以免影響檢測結果。 3、抽血時應